基于SIRT1-LXRα通路探讨泽泻汤改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究

Early study showed that Alisma Decoction improve the pathological change of vascular endothelial cells, macrophages and smooth muscle cells in the process of Atherosclerosis , based on LXRα regulating the lipid metabolism and inflammatory reaction; Recent research suggested that SIRT1 deacetylated LXRα and regulated the lipid metabolism and inflammatory reaction, so we use Alisma Decoction to intervene ApoE-/- AS mice, from peripheral blood, large artery, liver, abdominal cavity , In vitro lipid loaded macrophages culture, and the change of vascular endothelial cells, vascular macrophages and VSMCs in order to explore the mechanism of Alisma Decoction on AS and reveal the correlation with the SIRT1-LXRα pathway; To use of advanced small animal 7.0T MR and USPIO, dynamically observe the effect of Alisma Decoction on vascular morphology and vascular plaques of ApoE-/- AS mice model and observe the ability of macrophages swallow USPIO in plaques, comprehensively clarify the therapeutic effect of Alisma Decoction on AS and provide experimental basis for clinical application of classic prescription of Alisma Decoction of anti AS.

基于前期细胞水平研究证实泽泻汤改善动脉粥样硬化（AS）进程中血管内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞的病理病化，并能调节LXRα脂代谢和炎性反应。近来研究提示SIRT1对LXRα去乙酰化调节其脂代谢和炎性反应，本项目拟利用活体AS转基因动物模型ApoE-/-小鼠为研究对象，通过不同剂量的泽泻汤干预动物,从外周血、大动脉、肝脏等部位，采用活体巨噬细胞体外进行脂质负荷培养，以血管壁的内皮细胞、巨噬细胞及血管平滑肌细胞多维度进行研究，探讨泽泻汤抗AS的作用，揭示其与SIRT1-LXRα通路的相关性；探讨同时利用小动物7.0T MR仪和USPIO示踪剂，动态观察泽泻汤对ApoE-/-小鼠AS的血管形态和血管斑块的影响以及观察斑块内巨噬细胞吞噬USPIO的能力，全面阐明泽泻汤抗AS的疗效，为经典古方泽泻汤抗AS的临床应用提供实验依据，为中医药抗AS研究提供思路。

随着我国人民生活水平的提高，以动脉粥样硬化（AS）为病理基础的心脑血管病严重危害人类健康。前期研究证实泽泻汤改善AS进程中血管巨噬细胞和平滑肌细胞的病理变化，并能调节LXRα脂代谢和炎性反应；近来研究提示SIRT1对LXRα去乙酰化调节其脂代谢和炎性反应，故本项目拟利用活体ApoE-/-小鼠进一步探讨泽泻汤抗AS的作用，揭示其与SIRT1-LXRα通路的相关性。. 结果显示泽泻汤降低AS模型鼠总胆固醇及低密度脂蛋白含量，抑制TNF-α、IL-1β、MMP-2、MMP-9分泌，减少脂质在肝脏及血管内沉积，促进肝脏内的胆固醇转运相关蛋白SIRT1、LXRα、ABCA1的表达；而且泽泻汤及主要成分可以抑制模型鼠动脉内平滑肌细胞的表型转化，改善脂质在血管内脂质沉积。研究提示泽泻汤通过SIRT1-LXRα-ABCA1通路促进胆固醇逆转运，减轻脂质在肝脏及血管内沉积，改善炎症反应，发挥抗AS作用。. 本项目还发现高脂饮食介导下丘脑微炎症，对机体的能量代谢方面产生重要的影响；结合前期实验结果，推测下丘脑炎症与AS的发生发展密切相关。进一步研究提示泽泻汤能够抑制高脂饮食介导的下丘脑微炎症，其机制与SIRT1-NF-kB通路及miRNA密切相关。泽泻汤的主要活性成分泽泻醇A通过SIRT3抑制p-NF-kB的表达，减少高脂饮食介导的神经炎症。. 项目还从网络药理学角度探讨泽泻汤治疗AS的作用机制，发现泽泻汤还能够调控免疫防御反应、血液循环、 胰岛素抵抗及细胞凋亡等多种生物过程来协同发挥抗AS的作用。. 综上，我们发现泽泻汤及主要活性成分在不仅在外周通过调节脂代谢和炎性反应，在中枢还能减少高脂介导的神经炎症，协同抑制AS的发生和发展，为泽泻汤及主要成分改善代谢综合征提供实验依据。