Antrum mucosa protein-18（AMP-18）参与胃粘膜上皮细胞癌变的分子机制

Antrum Mucosa Protein-18（AMP-18）是一个胃粘膜组织中独特表达的蛋白质。我们发现，AMP-18在胃癌和胃癌细胞系中几乎不表达。但是，该蛋白在胃癌发生和发展的过程的作用尚不清楚。我们将首先研究AMP-18在胃癌细胞中的分泌行为。然后在此基础上，开展AMP-18蛋白质对胃癌细胞生长规律的影响的研究；进一步分析AMP-18是如何调节细胞周期信号通路，从而促使细胞增殖发生阻滞的。最后，我们还将采用基因芯片术研究AMP-18可能对信号通路相关基因表达的影响。本项目第一次应用分子生物学、细胞生物学和蛋白质组各项技术系统地研究AMP-18的生物功能以及分子机制，它的研究成果可能为探索胃癌的分子病理学开辟一条新的思路。

胃癌是最常见的恶性肿瘤，严重危害人类的健康。基于寻找胃癌特异肿瘤标记物的目的，我们进行了胃癌组织的蛋白质组学分析，在差异表达谱中，发现了具有胃组织特异性的蛋白质Antrum Mucosal Proein （AMP）-18。在本研究中，我们对AMP-18进行了系统的功能和分子机制的研究，试图揭示其参与胃癌的发生发展的分子机制。. AMP-18是一个功能研究较少的蛋白质。生物信息学分析显示，该蛋白质序列中含有一个分泌蛋白的信号肽序列。通过AMP-18在胃癌细胞系BGC-823的内源表达，和免疫荧光共聚焦技术，我们发现AMP-18的分泌是通过高尔基-内质网通路进行的；通过外源AMP-18与BGC-823共孵育，经免疫印迹和免疫荧光分析，我们确认AMP-18与胃癌细胞膜结合，呈典型的自分泌蛋白特征。利用重组AMP-18蛋白与BGC-823细胞共孵育，该癌症细胞出现明显的细胞老化，且伴随G1期的阻滞；将AMP-18蛋白质注射至小鼠肿瘤组织，可显著抑制肿瘤生长。免疫印迹的实验证据进一步证明，AMP-18可以通过激活BGC-823细胞内的Rb/16及p21waf通路诱导细胞老化，从而抑制肿瘤细胞的增殖。我们采用蓝色非变性胶电泳和LC ESI MS/MS联用的技术，寻找到BGC-823胃癌细胞系的AMP-18受体。我们进一步探讨了AMP-18刺激BGC-823细胞之后所引发的信号通路改变。. 综上所述，本项目综合应用各项技术，首次系统地研究AMP-18的生物功能以及分子机制，成果表明，AMP-18是一个新型的胃抑癌基因候选物。继续深入开展AMP-18的应用性研究，将有助于探索胃癌的分子病理学和发现新的胃癌治疗技术。