上皮细胞异常修复机制在慢性鼻-鼻窦炎发病机制中的作用研究

慢性鼻-鼻窦炎的病因及发病机制尚不清楚。以往研究认为CRS上皮的损伤和修复只是黏膜炎症产生的结果，但近来研究发现上皮细胞的异常修复反而是黏膜炎症持续慢性过程的原因。上皮细胞损伤和修复相关的多种细胞因子和信号转导系统成为近年来呼吸道炎性疾病的研究热点。本课题前期研究发现CRS上皮细胞中存在EGF和TGF-β蛋白表达异常，可能导致上皮细胞的异常修复。本研究将进一步探讨调控EGF和TGF-β表达的信号转导系统在CRS上皮损伤和修复机制中的作用。拟从蛋白和mRNA水平研究CRS患者和正常对照鼻黏膜上皮细胞在基线水平以及加入EGF和TGF-β后的细胞增殖情况；用相关抑制剂探讨TGF-β、EGFR激酶、EGF的ERK1/2激酶对CRS上皮细胞增殖的作用，进而揭示CRS发病过程中TGF-β异常升高对EGF诱导的细胞增殖和下游信号转导的抑制机制。如果该假说得到证实，将为CRS提供新的治疗靶点。

慢性鼻-鼻窦炎的病因及发病机制尚不清楚。以往研究认为CRS上皮的损伤和修复只是黏膜炎症产生的结果，但近来研究发现上皮细胞的异常修复反而是黏膜炎症持续慢性过程的原因。上皮细胞损伤和修复相关的多种细胞因子和信号转导系统成为近年来呼吸道炎性疾病的研究热点。本课题前期研究发现CRS上皮细胞中存在EGF和TGF-β蛋白表达异常，可能导致上皮细胞的异常修复。本研究进一步探讨了调控EGF和TGF-β表达的信号转导系统在CRS上皮损伤和修复机制中的作用。3年的潜心研究，实验分析CRS和正常对照的临床黏膜标本中TGF-β1和EGFR及其信号转导的差异情况，发现TGF-β1在CRSsNP和CRSwNP标本组织中密度明显不同，但是此差异并没有导致CRSsNP和CRSwNP间明显的细胞增值水平差异，在CRSsNP患者中, 虽然有TGF-β 信号通路上游信号的高水平表达，但是Smad7 蛋白表达水平增高可能抑制了下有信号（如pSmad3）的表达，进而抑制了TGF-β 的抗增殖作用。进行CRS患者和正常对照黏膜来源的上皮细胞增殖实验，发现CRS患者增殖基线较正常人群明显降低，在CRSsNP和CRSwNP间细胞增殖水平没有明显统计学差异。分别加入EGF、TGF-β1和抑制剂后观察分析上皮细胞增殖情况，发现EGF 在正常对照和CRS组都可以明显诱导细胞增殖，但是CRS对EGF的反应性降低；单独TGF-β1在正常人群和CRS 中都不影响细胞增值水平，但是TGF-β1明显抑制了EGF对正常人群和CRS的诱导增殖作用，这种抑制作用可以被TGF-β1受体抑制剂 （SB431542）阻断。但是TGF-β1受体抑制剂（SB431542）并不能阻断内源性TGF-β1对EGF的阻断作用，检测这些细胞中TGF-β1和EGFR信号转导情况，探讨TGF-β1抑制EGF诱导的上皮细胞增殖和下游信号转导的作用，发现在CRS细胞中ERK1/2 的磷酸化比率比正常对照组低。P21在CRS 细胞中高表达. ERK1/2 和p27 在CRSsNP 和CRSwNP间明显不同。本研究探讨CRS发病过程中TGF-β异常升高对EGF诱导的细胞增殖和下游信号转导的抑制机制。本实验按照预期计划基本完成。