母体慢性应激对子代注意缺陷多动障碍发生的影响及机制

有临床资料提示儿童注意缺陷多动障碍（Attention deficit hyperactivity disorder,ADHD）的发生，与母体在妊娠前和妊娠期的慢性应激有关。本项目采用慢性不可预见性应激母鼠模型，运用神经行为学观察子鼠在不同月龄的行为学变化，应用放射自显影技术测定子鼠大脑不同部位单胺类神经递质（5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺）转运体的分布和代谢情况，采用高效液相技术等分子生物学检测子鼠大脑单胺类神经递质及其受体、代谢酶和相关信号转导途径的信号级联变化，以及上述指标与母鼠应激强度、应激发生时间、子代性别、子代月龄之间的关系，从而明确母体慢性应激对子代ADHD发生的影响，并从遗传、环境与心理行为之间相互作用的角度探讨儿童ADHD的发生机制。研究结果可拓展对ADHD的认识，并在一个新的层面上为干预和防治该类疾病提供理论依据和方法。

本项目采用慢性不可预见性应激(CUS)母鼠模型，运用神经行为学方法观察子代大鼠的行为学变化，应用分子生物学技术检测子代大鼠大脑单胺类神经递质（5-羟色胺,5-HT；多巴胺, DA）及其代谢物的含量，以及相关受体、转运体的表达情况，从而探讨母体慢性应激对子代注意缺陷多动障碍(ADHD)发生的影响及机制。本研究发现，⑴妊娠前CUS 对妊娠21天胎鼠5-HT系统的影响：①CUS组胎鼠的体重低于对照组，而胎鼠的血清皮质醇(COR)和促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平高于对照组；②CUS组胎鼠海马和下丘脑中的5-HT水平均高于对照组，CUS组胎鼠海马中的5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平低于对照组；③CUS组胎鼠海马和下丘脑中的5-HIAA/5-HT比率低于对照组；④CUS组胎鼠海马中的5-HT1A受体含量低于对照组；⑤CUS组胎鼠海马和下丘脑中的色胺酸转运体(SERT)含量低于对照组；⑵妊娠前CUS 对1月龄子鼠DA系统的影响：①应激结束时和分娩后，CUS组母鼠血清CRH和COR水平均高于对照组；②强迫游泳实验中，CUS组子鼠不动时间长于对照组子鼠，而游泳时间少于对照组子鼠；③CUS组子鼠血清中的CRH和COR水平均高于对照组；④CUS组子鼠大脑额前皮质中的3 ,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)水平, DOPAC/DA比率, 多巴胺转运体(DAT), 去甲肾上腺素转运体(NET) 儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)的含量均低于对照组子鼠；⑤CUS组子鼠右侧额前皮质中的DOPAC水平, DOPAC/DA比率, NET和COMT的含量均低于左侧大脑额前皮质；⑶妊娠前CUS 对2月龄子鼠学习记忆能力及相关蛋白的影响：①水迷宫实验中，CUS组子鼠穿越平台次数少于对照组子鼠；②CUS组和对照组子鼠海马突触结合蛋白 I（sytI）和突触结合蛋白 IV（sytIV）在海马CA3层和DG层的差异有统计学意义；③CUS组子鼠海马CA1、CA3区蛋白激酶A（PKA）表达均较正常对照组子鼠低，④CUS组子鼠海马CA1、CA3和DG区ser133位点磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（P-CREB）表达均较对照组子鼠低。以上实验结果提示母体妊娠前CUS可对子代大脑单胺类神经递质及PKA信号通路中的神经蛋白产生影响，且这种影响可持续至子代成年后。本研究结果可拓展对儿童ADHD发生机制的认识。