肾衰营养胶囊对CRF营养不良大鼠E3基因调控通路的影响

本项目通过建立CRF营养不良大鼠模型，研究肾衰营养胶囊对CRF营养不良模型的治疗作用。体外用TNF-α构建骨骼肌细胞营养不良模型和E3基因（Atrogin-1及MuRF-1）沉默模型，证明E3基因调控UPS信号通路（Ub、p38MAP、MAFbx）、IGF-1/PI3K/Akt信号通路（IGF-1、PI3K、Akt、FOXO）、mTOR信号通路（TSC、mTOR、p70S6K）的作用及血清药理学方法证明肾衰营养胶囊对上述三条通路的作用。研究肾衰营养胶囊对在体CRF蛋白质营养不良大鼠E3基因调控上述三条信号通路的影响。探讨E3基因调控信号通路在CRF营养不良蛋白质高分解的作用及肾衰营养胶囊降低CRF营养不良蛋白质分解的机制。

营养不良是慢性肾衰竭(Chronic renal failure,CRF)患者最常见的并发症之一,其不仅具有明显的蛋白储备降低、血白蛋白水平下降、贫血等营养不良的特征,而且更突出地表现为进行性骨骼肌萎缩,瘦体质量丢失,机体蛋白质储备减少,并与患者不良预后密切有关。CRF营养不良病因及发病机制十分复杂。本项目通过建立 CRF营养不良大鼠模型，研究肾衰营养胶囊对 CRF营养不良模型的治疗作用。体外分别用 TNF-α、地塞米松以及过氧化氢构建骨骼肌细胞营养不良模型，证明 E3基因调控 UPS信号通路（Ub、p38MAPK、MAFbx）、I GF-1/ PI 3K/ Akt 信号通路（I GF-1、PI 3K、Akt 、FOXO）、mTOR信号通路（TSC、mTOR、p70S6K）的作用及血清药理学方法证明肾衰营养胶囊对上述三条通路的作用。结果显示：肾衰营养胶囊可增加CRF营养不良大鼠血清白蛋白、血红蛋白、红细胞计数、血清转铁蛋白受体、血清促红细胞生成素水平,改善骨骼肌萎缩。肾衰营养胶囊可能通过抑制CRF骨骼肌UPS激活，通过抑制促凋亡基因Bax的表达和增加抑凋亡基因Bcl-2的表达抑制CRF骨骼肌细胞凋亡，以及上调CRF骨骼肌Wnt7a/Akt信号通路来改善CRF骨骼肌萎缩。其含药血清通过改变bcl-2/bax比值,上调抗凋亡蛋白bcl-2、pro-caspases-3、pro-caspases-8 的表达水平,并同时抑制 caspase-3和8的激活,激活Akt信号通路, 对C2C12细胞分化过程中由TNF-a导致的凋亡有抗凋亡的作用。其含药血清可有效调控恢复地塞米松诱导C2C12骨骼肌肌管萎缩Akt/mTOR信号,增大肌管横径,从而改善骨骼肌萎缩状态以及对过氧化氢诱导的C2C12成肌细胞凋亡及氧化应激均具有改善作用。