活血解毒组分配伍干预急性心肌梗死后TLR-4信号通路的机理研究

Toll样受体4（TLR-4）信号通路是目前发现的AMI重要炎性通路之一，其下游炎症信号的级联式反应是介导急性心肌梗死（AMI）后心室重构（VR）的关键病理环节，因此临床上研制各种阻断或者抑制TLR-4信号通路上各个节点药物是目前心血管领域研究的热点，但目前仍然没有有效的治疗方法或药物可以通过作用TLR-4通路而对AMI后VR起作用。本研究采用大鼠AMI模型，选择既往研究证实能有效防治AMI的活血药赤芍有效组分赤芍总苷和解毒药黄连有效组分黄连生物碱有机配伍，从血清及心肌组织（梗死区、交界区及非梗死区）TLR4-核因子kB-前炎症因子信号转导通路相关炎症因子的基因蛋白表达、心肌细胞超微结构、心脏功能等方面，研究其抑制AMI后TLR-4炎症信号通路的细胞分子机理，为活血解毒中药配伍干预AMI后炎症反应提供实验依据，这对中医药防治AMI后VR、提高AMI的中医药二级预防水平，具有十分重要的意义。

【研究背景和研究目的】急性心肌梗死（AMI）后炎症反应贯穿始终，是触发和加重AMI后心室重构的关键病理环节。本研究旨在探讨AMI后关键的炎症信号通路TLR-4信号通路的动态演变过程及活血解毒组分配伍干预急性心肌梗死后TLR-4信号通路的作用机理。【研究方法及研究内容】本研究采用大鼠AMI模型，选择既往研究证实能有效防治AMI的活血药赤芍有效组分赤芍总苷和解毒药黄连有效组分黄连生物碱有机配伍，从血清及心肌组织（梗死区、交界区及非梗死区）TLR4-核因子kB-前炎症因子信号转导通路相关炎症因子的基因蛋白表达、心肌细胞超微结构、心脏功能等方面，研究其抑制AMI后TLR-4炎症信号通路的细胞分子机理。【研究结果】1. AMI后大鼠血清白细胞计数和中性粒细胞百分比在第3d时显著升高，第14d时回落；2.大鼠血清炎症因子NF-κB、TNF-α、MCP-1、hs-CRP和IL-1水平在AMI后升高；其mRNA及TLR-4受体mRNA表达量在第14d显著升高；3.AMI后炎症的动态反应与心室重构的进展密切相关；4.活血解毒组分配伍对AMI后血清炎症因子TNF-α，hs-CRP，IL-1β，TNF-α和MCP-1含量有不同程度的抑制作用，和模型组比较有显著差异（P<0.05）；6. 活血解毒组分配伍对IL-1mRNA、MCP-1mRNA和TLR-4mRNA表达有显著抑制作用，和模型组比较有显著差异（P<0.05）；7. 普通病理研究和电镜超微结构观察显示活血解毒组分配伍组对心肌细胞和线粒体有明显的保护作用；8.活血解毒组能够改善AMI后心脏功能，减少LVDs，提高射血分数，和模型组比较有显著差异（P<0.05）；9.活血解毒组对大鼠缺血心肌IL-1，MCP-1，TLR-4和NFκB的mRNA相对表达量有抑制作用（P<0.05）；10.与模型组比较，活血解毒组MCP-1，IL-1β和NFκB-p65蛋白表达明显降低（P<O.01)。【结论】AMI后炎症因子启动放大呈动态演变过程，与AMI后心室重构密切相关；活血解毒中药配伍能够全程干预TLR炎症信号系统的上游和下游炎症因子水平、基因和蛋白表达，从而保护心肌细胞，改善心脏功能。