基于IL-1、Lipin-1阐释虚寒证及虚热证模型的生物学机制

It has long been reported that interleukin 1 (IL-1) increasing with othercytokines play a pivot role in Yin Deficiency state. However, in our study in 973projects “study on fundamental issue related with the properties of traditionalChinese medicine”, the expression of IL-1 was found decreased and that of Lipin-1increased. What role the IL-1 and Lipin-1 really played in deficiency warm and coldsyndrome? In this study, deficiency warm syndrome and deficiency cold syndrome willbe induced, cold and warm tends, energy and glucose and lipid metabolism, cytokinenetwork of animals will be measured with cold and heat preference analyzer, basalmetabolic analyzer, ELISA, quantitative PCR, Western blot, etc. To active andinactive the signal transduction, IL-1 and IL-1Ra will be given to the animals, andalso Lipin-1 activator and inhibitor, and then observing the signs and indicatorsmentioned above in order to further explain the role of the IL-1 and Lipin-1. Todemonstrated the hypothesis that the active decreasing of IL-1 signaling pathwayas a common molecular basis, when the active and inactive of Lipin-1 as basis ofwarm and cold, and then Interpreting the molecular mechanism of deficiency warm and cold syndromes.

早有报道阴虚证本质是白介素 1 (IL-1)等细胞因子的生物学活性相对升高所致，但我们在 973 项目中药药性相关基础问题研究中发现虚热证及虚寒证均出现 IL-1 不同程度的表达降低，虚热证脂素 1(Lipin-1)基因表达增强。IL-1、Lipin-1 在虚热、虚寒证发生中作用如何？本研究拟建立虚寒与虚热证动物模型，采用寒热偏好测定、基础代谢测定、酶联免疫、定量 PCR、Western blot 等方法，观察虚寒、虚热证模型动物寒热趋向、能量及糖脂代谢、细胞因子网络的改变，特别是 IL-1、IL-1 受体及调节蛋白的改变及 Lipin-1 变化。并给予IL-1 及 IL-1 受体拮抗剂、Lipin-1 激活及抑制剂，进一步阐释其作用。论证 IL-1 信号通路降低是虚寒、虚热证产生的共同分子基础，Lipin-1 表达的高低，是产生虚寒、虚热差异的假说。阐释虚寒、虚热证的生物学机制。

建立符合中医理论的中医证候动物模型是中医药基础研究的核心，是开展中医证候研究、中药药性理论和方剂配伍研究，以及中药新药有效性评价的基础。其中，有关虚寒、虚热动物模型本质的研究一直是寒热病证研究的热点。项目通过开展实验研究，论证了“IL-1 信号通路降 低是虚寒、虚热证产生的共同分子基础，Lipin-1 表达的高低，是产生虚寒、虚热差异” 的假说。. 项目从虚寒证、虚热证模型中IL-1 及Lipin-1 变化规律、以方测证、IL-1 兴奋剂及抑制剂、Lipin-1 兴奋剂及抑制剂等正反多个角度，开展了IL-1 及Lipin-1 在两种证候模型中的作用及机制研究，论证了本项目的研究假说，在中医证候生物学机制研究方面取得了重要进展，项目的重要成果总结如下：. 方法学创新：项目利用TSE、红外成像等无损检测手段，从宏观上评估虚寒证及虚热证的整体能量代谢情况，并分别代入虚寒证与虚热证模型PLS 回归方程，对每只动物进行评分，判定模型是否成功。上述方法在模型评价方面发挥了重要作用，评价方法方面与之前相比取得了较大进展。. 项目取得的关键科学进展：本课题取得的关键科学数据，为阐释中医证候的生物学特征及机制提供了范例。项目从正、反两个方面论证了项目的科学假说，利用血清学指标检测、病理学、PCR、Western及蛋白质组学等方法研究了IL-1 及Lipin-1 的作用机制。研究结果显示，两种中医证候的发生与细胞因子网络改变密切相关。其中，虚寒证大鼠出现以Lipin-1为代表的能量代谢降低，以IL-1低下为代表的细胞因子网络紊乱，免疫能力降低，对外界的防御、抵抗能力降低。研究结果基本阐明了IL-1、Lipin-1在虚热中及虚寒证动物模型中的变化规律，肯定了项目提出的研究假说。. 项目对学科发展的促进作用：中医证候模型一直是中医、中西医结合学及中药科研究的重点和难点，相关研究的发展对于上述学科发展具有积极地促进作用。以上述两个中医证候生物学机制研究为基础，一方面可以此为基础进一步探讨其证候发生的深层次生物学机制，另一方面可以其为工具开展应用研究提供了科学依据。