TPOR与GHR信号通路交叉对话在巨核祖细胞增殖分化和血小板生成调控中的作用研究

由造血功能障碍引起的血小板减少症较为常见，有效调节骨髓巨核祖细胞增殖和分化是促进血小板生成的关键环节。血小板生成素(TPO)和生长激素(GH)均能通过激活各自受体而促进巨核祖细胞的增殖与分化。本室新近研究发现，TPO模拟肽与GH在促巨核祖细胞增殖分化和血小板生成方面可能存在着协同增强作用，其机制值得深入研究。由于TPO受体（TPOR）与GH受体（GHR）的结构特点和激活机制相似，且它们的表达、分布和稳定性均受耦联分子JAK2的调节，我们推测在巨核祖细胞增殖分化过程中TPOR和GHR信号通路间可能存在着交叉对话和协同增强作用。为此，本项目拟以人巨核祖细胞株Mo7e为研究对象，采用RNA干扰、激光共聚焦和流式细胞分析等技术，从受体表达、分布、活性等多方面，探讨TPOR和GHR信号通路间的交叉对话及其对巨核祖细胞增殖分化和血小板生成的调控作用，从而为血小板的生成调控和相关药物的研制提供新思路。

本项目旨在探讨TPOR和GHR信号通路间的交叉对话及其对巨核祖细胞增殖分化和血小板生成的调控作用。为此，在证实了巨核细胞共表达TPOR和GHR的基础上，我们首先构建了TPOR与GHR特异性RNAi表达载体。随后，利用RNAi、激光共聚焦、流式细胞分析及Western-blot等技术阐明了TPOR和GHR信号通路在巨核细胞增殖分化过程中的交叉对话和协同增强作用。其中，TPOR信号通路主要通过快速激活JAK2-STAT5和ERK1/2促进巨核祖细胞增殖分化，并能上调GHR表达水平。GHR信号通路不仅也能上调TPOR的表达，并通过缓慢持续激活ERK1/2促进巨核祖细胞分化，还通过激活成熟巨核细胞中的Akt促进巨核细胞终末分化及血小板的产生。通过本项目研究，为血小板减少症的临床救治探索了新思路，也为血小板生成调控相关药物的研制提供了理论依据。已申请并获得国家发明专利1项。研究结果在SCI收录的国外杂志上发表论文3篇，分别刊登在Applied Microbiology and Biotechnology、Journal of Radiation Research及Cell Death and Disease杂志上，另有1篇论文已被Blood杂志接受；在国内核心期刊杂志发表论文2篇；培养博士生2名、硕士生2名。