ATR介导的DNA损伤通路在截短型表面抗原增强HBV致病性中的作用及机制研究

Truncated hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) promotes HBV pathogenicity. Our previous study suggested that truncated HBsAg might enchance HBV tumorigenicity through ATR-dependent DNA damage response signaling pathway. . In this study, the xenograft implantation nude mouse model and the specific pathway inhibitor will be utilized to analyze the role of the ATR-dependent pathway in HBsAg-promoted HBV pathogenicity; the role of ATR-CHK1/SMC1 pathway on host cell cycle, and the role of ATR-SMC1 pathway on telomere maintenance will be analyzed to elucidate the molecular mechanism of how the truncated HBsAg utilizes the ATR-dependent pathway to promote HBV pathogenicity; furthermore, the expression of the truncated HBsAg and its association with the key molecules of the ATR-dependent pathway will be analyzed in clinical HBV-related hepatocellular carcinoma tissues, thus consolidating our findings from the cell and mouse models.. This study will help to elucidate the molecular mechanism of the truncated HBsAg-promoted HBV tumorigenicity, thus providing new targets for the treatment of hepatocellular carcinoma.

乙肝病毒表面抗原（HBsAg）截短可导致HBV致病性改变，我们的研究显示截短型HBsAg能增强HBV致瘤性，其机制可能与ATR介导的DNA损伤通路有关。. 本项目拟利用裸鼠荷瘤模型，通过观察阻断ATR通路对截短型HBsAg促瘤作用的影响，了解其是否通过ATR介导的DNA损伤通路增强HBV致病性；通过研究ATR-CHK1/SMC1通路对宿主细胞周期的影响，以及ATR-SMC1对"端粒维持机制"的作用，阐明ATR通路关键分子在截短型HBsAg增强HBV致病性中的分子机制；利用临床肝癌组织标本，研究截短型HBsAg的产生情况，分析其与ATR通路关键分子表达水平的相关性，从而深入了解截短型HBsAg在肝癌发生中的作用和机制。. 本研究将有助于阐明截短型HBsAg在增强HBV致病性中的分子机制，并为寻找HBV相关肝癌治疗的新靶点提供参考。

乙肝病毒表面抗原（HBsAg）截短可导致HBV致病性改变，我们的研究显示截短型HBsAg能增强HBV致瘤性，其机制可能与ATR介导的DNA损伤通路有关。本研究首先利用ATR特异性抑制剂阻断了截短型HBsAg促瘤作用，证明了截短型HBsAg通过ATR介导的DNA损伤通路增强HBV致病性。研究进一步利用ATR特异性通路抑制剂，探明了sW172*通过ATR介导的DNA损伤通路延长细胞周期S期，减少细胞凋亡。利用磷酸化蛋白芯片PEX100，筛选出在截短型HBsAg促瘤中起关键作用的ATR下游蛋白SMC1，并进行了验证。利用生信分析及基因剪技术，明确了SMC1的亚型SMC1B是截短型HBsAg促进HBV致瘤的关键蛋白，为后续研究奠定了基础。继而研究利用免疫荧光共聚焦结合Western Blot，证明了L02-pHBV4.1-sWl72*细胞中sW172*可能通过关键因子SMC1B影响端粒稳定性。利用基因组HBV捕获测序结合转录组测序，探明了HBV与宿主基因整合可产生HBV截短型S蛋白，且肝癌组织中整合产生截短型S蛋白较癌旁明显升高。最后研究利用肝癌，癌旁，癌栓组织转录组测序数据，发现SMC1B与整合产生的HBV截短型S蛋白表达成正相关。本研究将有助于阐明截短型HBsAg在增强HBV致病性中的分子机制，并为寻找HBV相关肝癌治疗的新靶点提供参考。