渤海产软海绵Halichondriasp.产生成分的研究

本课题的主要任务是建立人类疾病定位克隆的相关技术。引进了第二代捕获载体pSPL3b与sCOGH2，建立了“外显子捕获”这一新技术。使用基因组片断的连接产物直接进行转化，因而改进了技术，并建立了SmaRT克隆技术，能有效的进行PCR产物克隆。发现了pSPL3b载体上的6个隐含剪切位点，为这一载体的改进提供了依据，并建立了筛选克隆的一整套方法。将“外显子捕获”技术应用于5p的疾病基因分离，得到了上百个含外显子的克隆。本技术的最成功应用，捕获到了人类核孔蛋白NUP155的一段序列。现已把得到全长4512bp，能编分子量约为155kb的产物，并准确定位到5p13区域，据其结构分析，可能为智力与发育缺陷有关的候选基因。