联机检索Ti质粒激素合成相关基因;据其同源序列设计异戊烯基转移酶(ipt)基因探针引物,通过PCR从Ti质粒获取ipt探针。提取采集的病健枣树和泡桐总DNA,选择该类基因内无酶切位点的酶限制对其进行酶切,产物与所获探针进行了Southern非严格性杂交,探索了两者杂交的条件,同时也将酶切总DNA克隆,用获取的探针进行了点杂交,经过几轮筛选,结果不稳定。设计PCR方案,用设计的异戊烯基转移酶引物对总DNA进行PCR扩增,经过条件的优化和改进模板植物总DNA提取方法,在泡桐病样中扩增出预期大小的片段,在对照健样泡桐中未见此带,确证为类菌原体ipt基因,证实了此基因表达引起了患病植株的丛枝症状,为类菌原体病害的防治提供了重要依据。
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数据更新时间:2023-05-31
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