硫化氢对不同功能状态妊娠子宫肌作用差异的机制

要阐明子宫肌从静息转为收缩的机制，需要全面认识究竟有哪些内源性的宫缩调控因子以及它们的作用机制。我们前期工作提示硫化氢可能是一种内源性子宫舒缩调控因子。我们还发现，硫化氢对规律性宫缩（即临产）前后的妊娠子宫肌的作用不同：可抑制未临产子宫肌收缩性，但对已临产的子宫肌却没有明显影响。在此基础上，本项目将研究硫化氢对子宫肌收缩过程中的重要信号分子如Ca2+、MLC20磷酸化以及调控Ca2+、MLC20磷酸化的重要信号通路（PLC/IP3、cAMP/PKA、MAPK等）的影响；硫化氢对细胞膜离子通道活性的调节；对子宫肌内源性舒缩因子生成和释放影响；以阐明硫化氢对妊娠子宫肌作用的分子机制，从而发现导致硫化氢对临产前后子宫肌作用差异的关键分子。本研究结果将有助于揭示妊娠子宫静息终止转为收缩激活的机制，还可为发现控制妊娠子宫肌舒缩性的关键药物作用靶点提供新的思路。

硫化氢是继NO和CO之后发现的第三种具有生物活性的气体信号分子，研究发现H2S可舒张多种平滑肌，但是H2S是否可调节子宫平滑肌收缩性及其可能机制目前尚未见研究报道。为观察H2S对不同状态子宫肌的作用是否不同，我们将子宫肌分为足月未临产(TNL)和足月临产（TL）子宫肌进行研究。结果发现给予H2S供体NaHS及前体L-cysteine都能抑制离体子宫肌组织的收缩，而且L-cysteine对TNL组收缩的抑制作用明显强于TL组，结果还表明TNL组CSE和CBS表达以及H2S生成速率明显高于TL组，提示CSE和CBS在临产前后表达的变化可能在子宫肌由静息态转化为收缩态中发挥一定的作用。.有研究表明H2S可激活KATP通道，我们的研究表明给予KATP通道阻断剂预处理可阻断NaHS和L-cysteine舒张子宫肌的作用，提示H2S是通过激活KATP通道发挥舒张离体子宫肌的作用。由此我们进一步研究KATP通道蛋白在人类子宫肌上的表达，发现TNL组上段和下段的KATP通道各组成亚基蛋白表达量都高于TL组；用KATP通道激动剂diazoxide处理离体子宫肌组织，能抑制其自发性收缩，且diazoxide对TNL组的抑制效应明显强于TL组，提示临产前后KATP通道蛋白表达变化可能也与子宫由静息态向收缩态的转变有关。.除了KATP通道外，大电导钙离子激活的钾通道（BKCa）是子宫平滑肌上表达量最多的一种钾离子通道，对维持平滑肌静息起着关键性的调控作用。我们的研究发现，妊娠不同状态子宫肌表达的钙激活大电导钾通道（BKCa）水平有所不同，临产后BKCa 的表达量明显低于TNL组，BKCa通道激动剂NS1619能抑制离体子宫肌组织自发性收缩，且NS1619对TNL组的抑制效应明显强于TL组，提示临产前后BKCa通道蛋白表达变化可能也与子宫由静息态向收缩态的转变有关。我们的研究进一步贯彻与早产发生密切相关的促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）对BKCa通道蛋白表达是否具有调节作用，结果发现CRH可通过其I型受体（CRHR1）促进未临产子宫肌BKCa的表达，而通过CRH的II型受体（CRHRII）抑制临产子宫肌BKCa 的表达，提示在临产前后CRH对BKCa表达的不同调节可能是CRH促进子宫分娩启动的机制之一。