用4个转录因子(Oct4/Sox2/Klf4/c-Myc)转染体细胞后,能使细胞去分化并转变为胚胎干细胞样多能干细胞(iPS细胞)。这一iPS新技术已在小鼠和人上获得成功,但在山羊上未见报导。山羊具有生产肉、绒、奶等重要经济价值,培育山羊新品种的手段之一是利用干细胞进行转基因动物克隆。本研究室近年来从山羊囊胚内细胞团中分离得到了山羊胚胎干细胞,但由于优质胚胎获得较困难,建系成功率很低。因此,我们拟采用iPS技术,探索将Oct4、Sox2、Klf4以及Nanog、Dppa4等因子进行组合(排除致瘤因子c-Myc),采用病毒或质粒载体转染山羊成纤维细胞,经免疫组化和细胞分子生物学检测鉴定,最终获得山羊iPS细胞。并在"4因子"基础上寻找更有效的转录因子,降低致瘤因子作用,简化转染和筛选手段,从而形成一套适用于建立山羊iPS细胞系的技术路线,为分离和建立大动物胚胎干细胞系提供新方法。
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数据更新时间:2023-05-31
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