“神经胶质瘤信号通路”在胰腺癌神经浸润中的作用及其关键靶点的研究

The high recurrence and metastasis rate of pancreatic cancer is the main factor affecting the long-term survival rate，and the specific phenomenon "Perineural Invasion" is an important cause of recurrence in pancreatic cancer.Our and other studies have proved that perineural invasion was not a simply migration process along the peripheral nerve, but the result of the caner cells obtaining “neural invasion phenotype” in the regional microenvironment. Owing to the lack of " perineural invasion cancer cellline"， the current research outcomes are not consistent. Utilizing the patented perineural invasion cancer cellline,the Next-generation sequencing technology and the advanced biological information analysis systems,we found "Glioma signaling" pathway may play an important role in the perineural invasion of pancreatic carcinoma, and was confirmed by preliminary experiments.Consequently, we will use the lentiviral transfection,small RNA interference,animal model,human tissue specimens and someother experiments to further verify the function of Glioma signaling pathway and detail the key regulating and targeted molecules. The research results would elucidate the key mechanisms of perineural invasion, and may povide a new possible treatment to reduce Perineural Invasion in pancreatic cancer.

胰腺癌术后复发转移是影响远期疗效的主要瓶颈，而特有的神经浸润现象是胰腺癌易复发的重要原因。本人及其他相关研究证实，神经浸润并非是肿瘤细胞简单地沿低阻力外周神经进行迁移，而是在微环境因素下癌细胞获得浸润表型后的结果。由于缺少“神经浸润癌细胞”模型，目前对肿瘤细胞浸润表型的研究结果并不一致。而本课题使用自身“专利性”的胰腺癌神经浸润细胞模型，结合二代测序及新一代生物信息分析技术，发现“Glioma Signaling”通路在胰腺癌神经浸润过程中可能发挥了重要作用，并得到预实验的证实。在后续的实验中，我们将利用慢病毒转染，小干扰RNA等技术，在细胞、动物和人组织标本三个层次进行进一步验证和筛选，以明确该通路的在胰腺癌细胞中激活方式和关键的调控及作用靶点。预期本课题的研究成果不仅可以揭示胰腺癌神经浸润的关键机制，而且针对关键靶点采取的抑制手段，有可能为胰腺癌神经浸润的治疗提供新方法。

神经浸润是造成胰腺癌术后复发影响远期疗效的重要因素。有报道称几乎100%的胰腺癌患者伴随着神经浸润现象。我们在前期研究中发现胰腺癌的神经浸润现象并非肿瘤细胞简单的沿着低阻力神经外周转移，然而目前胰腺癌神经浸润的发生机制尚不明确。本研究发现胰腺癌神经浸润原代细胞系的迁移侵袭及神经定向迁移能力显著高于原位癌细胞系。通过全基因组测序与转录组测序，本研究发现Glioma信号通路在胰腺癌神经浸润细胞系中异常激活。进一步的研究证实，Glioma通路重要分子EGFR与IGFR的蛋白表达量与磷酸化水平在神经浸润胰腺癌细胞系中被上调，而Glioma通路另一个重要分子PDGFR在胰腺癌原代细胞系与人胰腺癌细胞系中均未见表达。抑制EGFR与IGFR的活性或下调其蛋白表达能够有效降低胰腺癌迁移侵袭能力及神经浸润倾向。通过对EGFR、IGFR下调的神经浸润胰腺癌细胞系进行RNA-seq测序分析，本研究发现并进一步通过实验证明EGFR与IGFR通过调控下游靶分子PLCγ1及PKCα发挥功能，人胰腺癌组织PKCα蛋白高表达与患者预后差及肿瘤神经浸润密切相关。综上所述，本研究证明Glioma信号通路参与胰腺癌神经浸润的过程是通过EGFR/IGFR-PLCγ1-PKCα信号轴实现的。本研究结果为阐明胰腺癌神经浸润分子机制及设计相应的治疗策略提供了理论依据。