病原微生物和宿主细胞之间复杂的相互作用是感染性疾病发生的基础,探讨这种相互作用的分子机制有利于确定微生物的毒力相关基因及致病机制。本研究旨在深入研究利用酵母双杂交技术筛选到的鼠疫菌蛋白YopK与人蛋白MATN2的相互作用,以期为深入揭示鼠疫菌的致病机制提供分子水平的证据。本研究首先通过GST-pull down、免疫共沉淀、激光共聚焦显微镜、表面等离子共振等技术验证和分析二者的相互作用和作用的结构域;分析鼠疫菌yopK突变株的细胞毒性和LD50,确定蛋白相互作用和毒力表型之间的关系;在细胞内过表达鼠疫菌YopK,检测它和MATN2结合后引起的细胞骨架改变、细胞生物学效应的改变等;最后利用RNA干扰(RNAi)技术使目的基因沉默,从而进一步研究基因的功能,并初步阐明该相互作用在鼠疫菌致病过程中发挥的作用,从而为鼠疫菌致病机制、预防和治疗的研究奠定基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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