羊布鲁氏菌蛋白组学和外膜蛋白免疫功能的研究

本课题在研究羊布鲁氏菌标准强毒株16M外膜蛋白蛋白质组学的基础上，对2D Western-Blot筛选的具有免疫原性和反应原性的主要外膜蛋白，通过MALDI-MS/MS质谱鉴定后，得到每个蛋白的相关生物学信息，以此作为诱饵蛋白，构建诱饵载体。用羊布鲁氏菌标准强毒株16M感染树突细胞,构建树突细胞cDNA文库，以此作为捕获蛋白，构建捕获载体。通过酵母双杂交RRS 系统筛选文库中与外膜蛋白相互作用的蛋白质分子，以进一步研究所选布鲁氏菌外膜蛋白的免疫功能和免疫机制。用筛选出来的外膜蛋白进行动物试验，研究布鲁氏菌主要外膜蛋白的免疫作用和保护功能，为研制安全有效的布鲁氏菌病新型疫苗提供功能确切的候选抗原。

本课题在研究羊布鲁氏菌标准强毒株16M外膜蛋白蛋白质组学的基础上，对2D Western-Blot筛选的具有免疫原性和反应原性的主要外膜蛋白，通过MALDI-MS/MS质谱鉴定，得到具有高免疫原性的外膜蛋白，以此作为诱饵蛋白，构建诱饵载体。用羊布鲁氏菌标准强毒株16M感染树突细胞,构建树突细胞cDNA文库，以此作为捕获蛋白，构建捕获载体。通过酵母双杂交RRS 系统筛选文库中与外膜蛋白相互作用的蛋白质分子，筛选到了与Omp25相互作用的NDAH还原酶装备因子2及与SOD及VjbR相互作用的核糖体蛋白S5。并用筛选出来的外膜蛋白进行动物试验，研究布鲁氏菌主要外膜蛋白的免疫作用和保护功能，为研制安全有效的布鲁氏菌病新型疫苗提供了功能确切的候选抗原。完成了合同任务书规定的各项指标。