Ⅰ型干扰素在体内对狼疮内皮祖细胞和动脉粥样硬化调控机制研究

动脉粥样硬化在系统性红斑狼疮中早期就可发生，已逐渐成为狼疮患者一个重要的死亡原因。前期已有研究建立起狼疮动脉粥样硬化小鼠模型，并显示狼疮和动脉粥样硬化存在共同的发病机制。I型干扰素在狼疮发病过程中起重要作用，推测这类因子可通过影响内皮祖细胞数量和/或功能而引起动脉粥样硬化。在本项目中，我们将以狼疮动脉粥样硬化模型为载体，通过功能激活和失活实验研究I型干扰素对EPC数量、迁移/黏附能力的作用及动脉粥样硬化的影响，为临床防治疾病、发展新的治疗措施提供理论依据。

在本项目中，我们成功建立了ApoE基因敲除（ApoE-/-）和FasL基因敲除（gld.）的gld.ApoE-/-C57BL/6狼疮动脉粥样硬化小鼠模型，这一模型鼠在正常饮食条件下，即可表现出进一步加重的狼疮样病变和动脉粥样硬化，其外周血及骨髓EPCs百分率下降，且功能受损。我们还发现gld.apoE-/- C57BL/6小鼠I型干扰素诱导基因IRF7、MX1、OAS1、OAS2、IFIT2、IFN-γ等表达水平均显著增高，表明其体内I型干扰素通路异常活化，且其干扰素指数与ds-DNA、蛋白尿水平正相关，这间接证实了IFN-I在狼疮发病中的重要作用；此外，干扰素指数与低密度脂蛋白水平及动脉粥样硬化斑块面积正相关，但与外周血及骨髓EPC百分率显著负相关，而之前有研究证实EPC数量及功能异常与动脉粥样硬化发生密切相关，这表明IFN-I可能通过影响EPC数量及功能参与gld.apoE-/- C57BL/6小鼠动脉粥样硬化的发生。我们进一步通过体内激活及抑制I型干扰素信号通路研究其对EPC数量、功能及对动脉粥样硬化的影响。发现CpG寡核苷酸（CpG-ODN）激动剂IRS423可促进I型干扰素诱导基因的表达，下调gld.ApoE-/-小鼠EPCs数量及功能，加重其动脉粥样硬化，而CpG-ODN拮抗剂IRS661处理则得到相反结果。这进一步表明gld.apoE-/- C57BL/6小鼠体内加重的动脉粥样硬化可能与其EPC数量及功能失调相关，且这一过程由其体内过度活化的IFN-I信号通路介导。如期完成上述研究内容后，我们又增加了部分体外实验，用不同细胞因子或免疫复合物试剂（PBS、IL-1β、TNF-α、IRS661、IRS423及IFN-α等）处理gld.apoE-/- C57BL/6小鼠EPC并检测其功能。初步结果显示只有IFN-α可显著降低其EPC功能，其他干预均无明显作用，从而体外证实IFN-α参与gld.apoE-/- C57BL/6小鼠EPC功能受损。通过本研究我们初步得出以下结论：gld.apoE-/- C57BL/6小鼠可于普通饮食下出现狼疮及动脉粥样硬化加重表现，这可能与其体内过度活化的IFN-I信号通路下调EPC数量及功能有关。本研究初探了导致SLE动脉粥样硬化率高且病情重的可能的部分发病机理，为发展新的治疗方案提供理论依据。