肺腺癌干细胞特征性miRNA的筛选及其功能初步鉴定

支气管肺泡干细胞(BASC)突变为肺腺癌干细胞是肺腺癌的"起源"，是肺腺癌复发、转移、耐药的"根本原因"。鉴于作为一类调控性非编码小分子RNA的miRNA，在维持正常干细胞功能及参与恶性肿瘤发生中起重要作用，本项目拟采用流式细胞仪从小鼠肺癌和正常肺细胞株中初步分选肺腺癌干细胞和BASC，经功能鉴定和单克隆培养纯化后，提取细胞小RNA片段，miRNA基因芯片杂交筛选肺腺癌干细胞miRNA表达谱，分别选择3-4个肺腺癌干细胞中最显著高表达及低表达的miRNA序列，生物信息学初步分析及基因组寡核苷酸微阵列验证miRNA作用靶点，并利用2'-O-甲基化反义核酸技术及基因真核表达技术，分别建立miRNA低表达及高表达的肺腺癌干细胞体系，观察癌干细胞恶性表型相关改变，分析miRNA的确切生物功能，探明miRNA参与肺腺癌干细胞发生的分子机制，可望为肺腺癌早诊、预后监测以及靶向基因治疗提供新的分子靶点。