mTOR/p70S6K/S6信号途径调控DDAH2翻译在肝癌生长及血管生成中的作用与分子机制研究

一氧化氮（NO）参与了肝细胞性肝癌（HCC）生长与血管生成的调节，而内源性NO合酶（NOS）抑制物非对称二甲基精氨酸（ADMA）及其代谢酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）通过影响NOS活性间接调控NO生成。mTOR/p70S6K/S6信号通路通过增加含5'TOP结构mRNA的翻译从而调控蛋白质的合成。本项目拟观察DDAH2在HCC组织的表达，并探讨DDAH2对HCC生长及血管生成的调节作用及其机制；在细胞及动物水平，确认激活的mTOR/p70S6K/S6通路是否通过调控DDAH2 mRNA翻译，促进肝癌生长和血管生成；并构建DDAH2 5'TOP结构突变的荧光素酶报告载体，与mTOR质粒共同转染人肝癌细胞株SMMC-7721，直接观察DDAH2 mRNA的翻译是否依赖于mTOR信号相关的5'TOP结构。本研究将有助于阐明肝癌生长和血管生成的机制，为临床治疗HCC提供新靶点和新思路。

一氧化氮（NO）参与了肝细胞性肝癌（HCC）生长与血管生成的调节，而内源性NO合酶（NOS）抑制物非对称二甲基精氨酸（ADMA）及其代谢酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）通过影响NOS活性间接调控NO生成。本项目探讨了mTOR/p70S6K信号途径调控DDAH2翻译在肝癌生长及血管生成中的作用及分子机制研究。研究结果显示：HCC患者肝癌组织DDAH2蛋白表达明显高于癌旁组织；HCC患者血浆ADMA水平明显低于正常对照组，患者血浆ADMA水平与肝癌组织DDAH2蛋白表达水平成负相关；HCC患者肝癌组织VEGF蛋白表达明显高于癌旁组织，并与DDAH2蛋白表达水平成正相关；在体外培养的SMMC-7721肝癌细胞，过表达DDAH2上调VEGF的表达；过表达mTOR上调SMMC-7721肝癌细胞DDAH2的蛋白表达，但不改变DDAH2 mRNA水平；在人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型，过表达mTOR调控DDAH2 mRNA翻译，但不改变DDAH2 mRNA水平。该研究证实，mTOR/p70S6K信号通路调控DDAH2基因翻译从而介导HCC的发生与发展。