人红细胞膜DAF的分离纯化及功能研究

本研究在建立经典途径C3转化酶衰变活性检测方法的基础上，运用液相色谱方法分离纯化人红细胞膜DAF。经SDS-PAGE、免疫印迹及生物学活性鉴定，证实所得电泳纯蛋白为DAF分子。采用B淋巴细胞杂交瘤技术，成功建立三株抗人DAF的杂交瘤细胞株，分别命名为DG3、DG9和DA11。三株单抗分别针对DAF分子中的SCR3、SCR1及SCR4。且DG3、DA11可中和DAF的促衰变加速活性。在此基础上建立DAF的亲和层析常规分离方法。纯化的DAF及CD59均能有效抑制同源补体对外源红细胞及有核细胞的溶破，但未观察到两分子间的协同作用。单独或联合使用抗人DAF及抗人CD59的单抗，初步观察了DAF及CD59在T淋巴细胞活化中的作用及相互关系。本研究为进一步研究DAF的结构与功能提供了重要的实验材料和实验基础。