调节性B细胞在自身免疫性甲状腺病发病中的作用及机制研究

自身免疫性甲状腺病（AITD）包括自身免疫性甲状腺炎（AIT）和Graves病（GD），是器官特异性自身免疫病，已知细胞免疫和体液免疫异常参与疾病发病，但机制仍待研究。调节性B细胞（Breg）是一群新近发现的具有免疫调节作用的B细胞亚群，主要表型为CD1dhighCD5+CD19+，在脾脏和外周血中数量微少，却通过分泌IL-10等因子发挥免疫调节作用。去除Breg使EAE等疾病加重，输入Breg可降低NOD鼠糖尿病的发病。我们前期研究显示：碘诱导的NODH-2h4小鼠AIT发病中、Ad-TSHRA诱导的GD模型脾细胞均存在Breg表达减少、IL-10mRNA表达下降。既往研究还显示IL-10对GD和AIT发病具有保护作用。本研究拟通过NOD.H-2h4小鼠模型和GD模型并引进IL-10基因敲除鼠探讨Breg在AITD发生发展中的作用及机制，为临床开展以B细胞为靶点的自身免疫病治疗提供依据。

自身免疫性甲状腺病（AITD）包括自身免疫性甲状腺炎（AIT）和Graves病（GD），是器官特异性自身免疫病，发病机制仍待研究。调节性B细胞（Breg）是一群具有免疫调节作用的B细胞亚群，主要表型为CD1dhighCD5+CD19+，在脾脏和外周血中数量微少，却通过分泌IL-10等因子发挥免疫调节作用。去除Breg使EAE等疾病加重，输入Breg可降低NOD鼠糖尿病的发病。本研究通过NOD.H-2h4小鼠模型和GD小鼠模型并结合IL-10基因敲除鼠探讨Breg在AITD发生发展中的作用及机制，为临床开展以B细胞为靶点的自身免疫病治疗提供依据。.NOD.H-2h4小鼠饮高碘水发生AIT的小鼠脾脏B细胞中CD1dhi+CD5+CD19+ Breg比例和脾细胞中IL-10 mRNA、TGF-β mRNA表达量较对照组明显降低（P < 0.05），且随炎症程度升高而进一步降低；T细胞中CD4+CD25+foxp3+ Treg比例明显降低（P < 0.01）, 而其T细胞中CD4+IL-17+ Th17比例则显著升高（P < 0.01）；脾细胞中Breg与Treg、Th17所占比例分别呈显著正相关及负相关（P < 0.05）。mTg免疫IL-10-/- BALB/c鼠和IL-10-/- C57BL/6鼠可诱发EAT，成模率分别为25%和33.3%，说明IL-10能改变EAT的易感性，升高的B细胞比例可能是血清高TgAb的产生机制之一，CD19+CD5+CD1dhiB细胞、Th1型细胞，Th17型，Treg细胞均在EAT模型的发病过程中发挥作用。将IL-10-/- C57BL/6 雄鼠和IL-10-/- BALB/c雄鼠分别与NOD.H-2h4雌鼠反复回交建立IL-10-/- NOD.H-2h4小鼠模型。发现自然情况下缺乏IL-10的NOD.H-2h4小鼠较杂合子表达较低水平的炎症因子IL-4和IFN-γmRNA及相应转录因子GATA3和T-bet mRNA以及较低水平的保护因子Foxp3 mRNA和TGF-βmRNA，同时该小鼠自发TgAb水平更高，甲状腺炎症评分更高，提示缺乏IL-10使NOD.H-2h4小鼠更加易感AIT。当给予NOD.H-2h4小鼠回输未发病小鼠的Breg细胞后，甲状腺炎评分相比于对照组具有降低的趋势，血清TgAb水平较对照组具有降低的趋势。这些结果提