转移相关基因FMNL2参与大肠癌Rho细胞运动信号通路的机制探讨

前期工作中我们提出了转移相关基因FMNL2参与大肠癌Rho细胞运动信号通路的新设想。为了验证这一设想，确定FMNL2在通路中的作用环节和关键作用蛋白，本研究拟观察FMNL2不同截短子转染后对LPA诱导的RhoA/ROCK信号途径及MAL/SRF转录途径的影响；分别给予RhoA、ROCK及SRF活化的抑制剂并结合F-肌动蛋白荧光定量分析，观察对两种途径的影响及两种途径的相互关系，确定FMNL2的作用环节；然后利用免疫共沉淀和共定位检测FMNL2是否与四种RhoGEF蛋白相互作用，应用酵母双杂交筛选新的FMNL2相互作用蛋白并进行相关验证；最后利用RNA干扰和荧光酶报告系统观察筛选出的FMNL2相互作用蛋白对设想通路的影响。旨在阐述FMNL2参与大肠癌Rho细胞运动信号通路的新机制，揭示FMNL2参与大肠癌转移的新途径。