氧氟沙星手性单链抗体制备及其手性识别差异机制研究

在手性水平上对食品污染物进行免疫分析已成为环境与食品安全科学研究的重要课题，但是国内外对手性选择性抗体的免疫识别机制基础研究数据非常缺乏。本项目选择S型和R型氧氟沙星单体为半抗原，将其分别与载体偶联制备出人工抗原后免疫动物，获取亲本单克隆抗体，比较分析其特异性、亲和性，进而通过噬菌体表面展示技术构建抗体库制备单链抗体（scFv），错配PCR等体外进化手段对scFv定向进化，调整scFv的手性选择性，结合同源模建、分子力学和动力学模拟、分子对接等手段，分析scFv的手性选择性变化规律，阐释其半抗原立体结构与抗体识别的差异机制。本项目的开展将为手性半抗原类物质的scFv制备及其免疫分子识别机制提供基础数据，对进一步阐明半抗原-抗体的构效关系，建立高灵敏、高选择性免疫分析、分离方法，具有重要的理论和实践探索意义。