miR-155介导的C/EBPβ信号通路对Tfh细胞分化的调节在SLE发病中的作用机制研究

MicroRNA-155 (miR-155) was previously found involved in and a key regulator of the development of systemic lupus erythematosus (SLE), despite of not fully understood detailed mechanism.C/EBPβ was found as a new target gene of miR-155 by in vitro and in vivo studies, with its expression decreased in SLE patients. Furthermore, miR-155 and C/EBPβ have the binding domains of each other and usually act together as a double negative feed-back loop in diseases. Hence we figure that miR-155 and C/EBPβ interact with each other to mudulate the differeantation and function of Tfh in SLE pathogenesis. To explore the role of miR-155 and C/EBPβ pathway in the differentiation and function of Tfh cells and pathogenes of SLE, we will detect the marker fluctuation of isolated Tfh cells from perepheral blood of SLE patients after upregulation or downregulation of miR-155 and C/EBPβ, meanwhile we will employ miR-155- /-Fas lpr/lpr mice to determine their interacting effect on Tfh cells and SLE with RT-PCR,Western blot, and luciferase reporter assay. Our study may provide new clues for unvailing pathogensis and improving treatment of SLE.

miR-155通过调节Tfh细胞影响B细胞分化、增殖，是SLE发生发展的核心环节，但机制尚不清楚。我们前期的研究发现，miR-155的靶基因C/EBPβ参与SLE发病，患者Tfh细胞上miR-155和C/EBPβ的表达量相关。此外，miR-155和C/EBPβ在结构上都具有对方的结合位点，二者往往通过形成双重负反馈通路发挥作用。因此，我们推测miR-155正是通过与C/EBPβ相互作用调控Tfh的分化和功能参与SLE的发生和发展。本课题拟分离培养SLE患者外周血Tfh细胞，检测上调和/或下调miR-155和/或C/EBPβ基因表达后Tfh细胞分子标记物表达变化，探讨二者对Tfh细胞功能的影响；构建miR-155和/或C/EBPβ基因敲除小鼠模型，探讨在体条件下二者的表达量和相互作用对Tfh细胞分化、功能及狼疮进展的影响，从而为研究SLE发病机制和治疗靶点提供新的线索。

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种以自身抗体过度产生、免疫复合物沉积和多器官受累为基本特征的自身免疫疾病。滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cells，Tfh）是一种表达CXCR5的CD4+ T细胞亚群，可活化生发中心并辅助B细胞类别转换、体细胞超突变和抗体产生，在B细胞免疫应答中起关键作用。而滤泡调节性T细胞（follicular regulatory T cells，Tfr）是由调节性T细胞分化而来，抑制Tfh细胞调节的体液免疫应答。研究认为Tfh和/或Tfr细胞紊乱可能会导致生发中心反应异常，产生自身抗体，进而引发自身免疫性疾病。miR-155通过调节Tfh细胞影响B细胞分化和增殖，是SLE发生发展的核心环节，但机制尚不清楚。本项目探讨SLE患者外周血中miR-155及其靶基因C/EBP β的表达水平与Tfh和Tfr频率的相关性，阐明SLE患者外周血中miR-155和C/EBP β的表达水平同SLEDAI及Tfh细胞频率正相关，提示miR-155和C/EBP β可能通过调控Tfh细胞的分化与功能而参与SLE疾病的发生与发展。另外，SLE部分患者可发展为狼疮性肾炎患者，为了更好的阐明SLE的发病机制，我们通过回顾性分析进一步探讨狼疮性肾炎患者面部蝶形/盘状红斑和肾脏损害的关系，以及分析狼疮性肾炎患者不同病理分型与临床疾病活动性和预后的关系以及终末期肾病的危险因素，阐明不伴皮疹的狼疮肾炎患者更易发生肾功能不全以及揭示狼疮性肾炎Ⅲ/Ⅳ（伴或不伴狼疮性肾炎Ⅴ）型患者表现出更高的疾病活动性、肾脏和肾外损害更重和发展为终末期肾病的风险更高。