人结肠癌干细胞的免疫原性及其体内免疫应答效应研究

基于当前在免疫缺陷小鼠中的研究结肠癌干细胞可能忽略了免疫系统对肿瘤形成的重要作用，本研究拟①建立具有功能性人体免疫系统的人源化小鼠模型：人CD34+脐带血细胞植入新生NOD/LtSz-scid IL2rg-/-免疫缺陷小鼠；②鉴定人源化小鼠模型；③建立荷瘤动物模型：以CD133为标志从病人结肠癌组织中分离肿瘤干细胞，按高、中、低不同细胞剂量将CD133+和CD133-肿瘤细胞分别接种人源化小鼠和免疫缺陷小鼠；④检测小鼠成瘤情况及其肿瘤干细胞的分化：记录肿瘤形成时间、肿瘤大小和小鼠死亡率，检测瘤体中肿瘤干细胞比例和肿瘤细胞的凋亡；为了深入研究肿瘤干细胞致瘤的可能机制⑤检测结肠癌干细胞与免疫原性相关的分子；⑥检测抗肿瘤免疫效应：肿瘤特异性抗体和肿瘤特异性杀伤T细胞的细胞毒作用。探讨结肠癌干细胞的免疫原性及其免疫效应为将来的肿瘤干细胞靶向治疗提供实验依据。