薏苡仁生物活性肽的获得及其生物学功能研究

以植物蛋白为来源获得生物活性肽是近年来医药领域的研究重点之一。研究表明玉米多肽具有降压、抗氧化、增强机体免疫力等作用。同科的薏苡仁醇溶蛋白含量、氨基酸序列与玉米高度相似，且富含脯氨酸、谷氨酸等生物活性肽末端偏好氨基酸。本课题拟采用不同的蛋白酶对薏苡仁醇溶蛋白进行酶解、分离、纯化，以获得生物活性肽。通过生物肽对血管紧张素转化酶（ACE）活性影响、Wistar大鼠、自发性高血压大鼠和肾性高血压大鼠血压和肾素、血管紧张素水平影响的分析考察生物肽的降压活性；体内外给药后对小鼠脾脏细胞增殖、巨噬细胞NO水平和酸性磷酸酶活性的影响及总抗氧化能力和丙二醛（MDA）含量来考察生物肽的免疫活性和抗氧化能力，可望获得多功能生物活性肽。通过本课题可以为高血压疾病和免疫相关疾病的治疗提供安全可靠的化学合成药物的替代品，同时可发掘薏苡仁新的药用价值。

生物肽益于提升机体功能和状态，在激素调节、免疫调节、抗高血压、抑菌、抗氧化等方面发挥着重要的生物功能。本课题以薏苡仁谷蛋白和醇溶蛋白为研究对象，建立了薏苡仁生物肽制备的方法体系，采用多种方法对其进行分离纯化并进行了结构鉴定。对小分子生物肽的降压和免疫学功能进行了探讨，具体成果如下：. 1、新体系的建立：建立了薏苡仁生物肽制备体系。.采用顺序抽提法获得薏苡仁各蛋白组分，然后以谷蛋白和醇溶蛋白为研究对象，以ACE抑制活性为筛选指标，选用不同酶对蛋白进行水解，研究表明胃蛋白酶为最佳水解蛋白酶。以水解度为筛选指标，采用单因素和正交实验对水解条件进行优化，获得谷蛋白和醇溶蛋白的最佳水解工艺参数，为大规模制备薏苡仁降压肽提供依据。.2、新方法的建立：建立了薏苡仁生物肽分离纯化及结构鉴定方法体系。.首先建立了稳定的ACEI体外筛选方法体系；将谷蛋白胃蛋白酶水解物依次采用超滤法、凝胶过滤色谱、离子交换色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化，使其活性部位逐渐集中，并采用质谱方法将高活性组分进行了结构解析。.3、薏苡仁谷蛋白小分子肽（≤3 KD）生物学功能的研究. 以SHR为研究对象进行谷蛋白小分子肽体内药效学实验，分单次给药和长期给药（连续给药10天），比较给药前后SHR血压、血浆肾素活性和血管紧张素II浓度变化，结果表明小分子肽具有明显的体内降压效果，并为薏苡仁生物肽的安全用药提供初步实验数据。.研究了谷蛋白小分子肽对小鼠巨噬细胞白血病细胞（raw264.7）产生NO的影响、小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖影响。连续给药三周，考查了小分子肽对小鼠脾脏指数、胸腺指数、肝脏指数和血清丙二醛含量的影响。结果表明小分子肽能够显著提高小鼠的脾脏指数，一定浓度的生物肽能降低小鼠血清中丙二醛的含量，从而为薏苡仁的药性理论提供科学依据。.4、应用价值.（1）本课题培养了中药活性蛋白与多肽研究领域的专业人才，促进了我国该领域的可持续发展。（2）研究中所建立的新方法、新体系，是薏苡仁功能产品开发的重要基础。