乳腺癌PIWIL2、PLAC1抗原HLA-A2限制性CTL表位鉴定以及综合改造策略研究

乳腺癌是全世界范围内造成妇女死亡的最常见癌症，我们通过对癌-睾丸抗原数据库进行筛选，发现两个新定义的CT抗原PIWIL2（CT80）与PLAC1（CT92）在乳腺癌中的表达率均超过了80%，并且与乳腺癌的发生、发展关系非常密切，是非常理想的乳腺癌免疫治疗靶点。本项目拟首先对这两种抗原的HLA-A2限制性CTL表位进行预测，然后通过锚定位点的氨基酸替换、1位Tyr及其类似物替换和氨基末端引入穿膜肽Tat序列这几种改造策略的综合应用，同时增强候选表位的结合力、免疫原性、酶降解稳定性以及被树突细胞呈递的效率；通过T2细胞结合力与稳定性实验和体外免疫活性测定对这些候选表位进行筛选，通过酶降解稳定性实验、树突细胞膜穿透实验和转基因小鼠体内免疫活性实验对其作用机制进行研究。研究结果将为乳腺癌的多表位疫苗设计和免疫治疗提供新的重要表位，同时为抗原肽的综合优化策略提供新的设计思路和方法。

乳腺癌是全世界范围内造成妇女死亡的最常见癌症，我们通过对癌-睾丸抗原数据库进行筛选，发现两个新定义的CT抗原PIWIL2（CT80）与PLAC1（CT92）在乳腺癌中的表达率均超过了80%，并且与乳腺癌的发生、发展关系非常密切，是非常理想的乳腺癌免疫治疗靶点。本项目首先对这两种抗原的HLA-A2限制性CTL表位进行预测，然后通过锚定位点的氨基酸替换、1位Tyr及其非天然氨基酸类似物替换等改造策略的综合应用，通过T2细胞结合力与稳定性实验和体外免疫活性测定对这些候选表位进行筛选，通过酶降解稳定性实验和转基因小鼠体内免疫活性实验对其作用机制进行研究。我们的研究结果发现来自于PLAC1抗原的P28、P31及其改造肽具有很好的体内外免疫活性。来自于PIWIL2抗原的P724（即PL2L60的P281）的Tyr类似物改造肽能够同时增强候选表位的结合力、免疫原性、酶降解稳定性以及体内的免疫活性，并且这种改造的思路也能应用于经典的CTL表位的改造。