乙肝病毒X蛋白导致人肝细胞转化中与survivin协同作用的研究

乙型肝炎病毒(HBV)感染与肝癌的发生具有十分重要的关系，但分子机制不清。申请者前期研究发现在肝癌组织中乙肝x抗原和survivin均有较高水平表达，提出"在HBV致癌过程中乙肝病毒x基因（HBx）与survivin具有协同作用"的假说。初步实验结果已支持上述假说。本课题拟克隆HBx基因和survivin基因不同片段，并构建survivin基因有意义点突变的真核表达载体；应用人正常肝细胞系L-O2，分别进行HBx、survivin和二者的稳定基因转染，比较其转化效果；应用靶向HBx基因和survivin基因的RNA干扰，验证HBx基因和survivin基因的协同作用；确定HBx基因和survivin基因的功能位点；研究HBx基因和survivin基因在中心体上的定位关系，阐明HBx与细胞有丝分裂的关系。将上述阳性结果在培养的正常人或鼠肝细胞中验证。本研究将有助于进一步阐明HBV的致癌机理。