IL-36γ通过Wnt/β-catenin信号通路对寻常型银屑病中角质形成细胞分化与炎症反应的调控作用

The abnormal differentiation and inflammatory reaction of keratinocytes caused by IL-36γ have become a research hotspot in the area of psoriasis vulgaris in recent years. Wnt/β-catenin signaling pathway is closely related to cell differentiation and inflammation. Nevertheless, the exact role of Wnt/β-catenin signaling pathway in physiological and pathological effects of IL-36γ is not clearly understood. Furthermore, our preliminary studies had revealed that there was an increase of IL-36γ in the lesions of psoriasis vulgaris compared with healthy skin. In addition, for HaCaT cells, the inhibitor of Wnt/β-catenin signaling pathway can block the effects of IL-36γ. Our study suggesting that Wnt/β-catenin signaling pathway is a key contributor in IL-36γ-induced abnormal differentiation and inflammatory reaction of keratinocytes. This study is thus designed to investigate the effect of IL-36γ on keratinocytes. In addition, the potential role of Wnt/β-catenin signaling pathway in IL-36γ related abnormal differentiation and inflammatory reaction of keratinocytes will be explored by using inhibitor of Wnt/β-catenin signaling pathway, IL-36γ-/- mouse model and KRT14-Cre+.β-cateninflox/flox mouse model. The results of the present study may provide experimental evidence for further exploring the role of Wnt/β-catenin signaling pathway in IL-36γ-induced abnormal differentiation and inflammatory reaction of keratinocytes.

IL-36γ调控角质形成细胞分化及炎症反应是银屑病研究的热点之一。已报道，Wnt/β-catenin信号通路与细胞分化及炎症反应密切相关，但是否参与IL-36γ的作用尚未见报道。我们研究发现在寻常型银屑病皮损中，IL-36γ的表达明显高于健康对照组；且Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(IWP-2)可阻断IL-36γ对HaCaT细胞分化与炎症的作用，故推测IL-36γ可能通过Wnt/β-catenin信号通路调控角质形成细胞分化与炎症反应。本研究拟探讨IL-36γ对寻常型银屑病中角质形成细胞的影响，并利用IWP-2，IL-36γ-/-小鼠模型，KRT14-Cre+.β-cateninflox/flox小鼠模型，进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在此过程中的作用。结果将揭示Wnt/β-catenin信号通路在IL-36γ调控寻常型银屑病角质形成细胞分化和炎症反应中的可能作用。

寻常型银屑病(psoriasis vulgaris, PsV)为一种常见的慢性炎症性皮肤病，以角质形成细胞的异常分化、增殖及炎症反应为主要病理生理特点。IL-36γ 属于IL-36家族，通过与IL-36受体结合后发挥作用。既往研究表明寻常型银屑病患者皮损组织中IL-36γ表达升高，但IL-36γ对PsV皮损组织中角质形成细胞的分化及炎症反应中的作用，目前尚不清楚。本项目主要研究目的为明确IL-36γ在PsV皮损组织中角质形成细胞的分化及炎症反应的调节作用，并探寻Wnt/β-catenin信号通路在此生理及病理过程中所发挥的作用。本项目构建稳定敲减 β-catenin 的HaCaT 细胞，采用荧光定量PCR、Western blot、CCK-8法等方法检测HaCaT细胞的增殖、角质形成细胞分化指标、炎症因子的表达；构建IL-36γ沉默表达小鼠，采用咪喹莫特（imiquimod, IMQ）构建银屑病小鼠模型，检测皮损组织中表皮厚度、角质形成细胞分化指标及炎症因子、Wnt/β-catenin信号通路关键分子等的表达水平。我们研究发现，IL-36γ在PsV患者皮损组织中表达升高，而角质形成细胞分化指标表达下降；IL-36γ可抑制角质形成细胞分化并促进角质形成细胞炎症反应；采用特异性抑制剂阻断Wnt/β-catenin信号通路可抑制IL-36γ对角质形成细胞分化及炎症反应的作用；在咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型中，IL-36γ可加重小鼠中银屑病样皮损炎症程度，经特异性Wnt/β-catenin信号通路抑制剂处理后，可减轻该促进作用；在IL-36γ沉默表达小鼠中，IMQ/ IL-36γ组银屑病样皮损严重程度明显高于IMQ组小鼠，并且角质形成细胞分化指标表达下降，炎症因子与Wnt/β-catenin信号通路关键分子表达上升。上述结果表明，IL-36γ可通过抑制角质形成细胞分化、促进炎症反应，从而促进PsV的发生发展，并且Wnt/β-catenin信号通路在其中可能发挥重要作用，为PsV的发病机制、治疗提供新的研究方向和可能的治疗靶点。