Wnt信号转导通路关键靶点β-catenin的调控在寻常型银屑病发病机制中的作用

银屑病是多基因遗传背景下的T细胞介导的免疫性疾病，是一种较难治愈的顽症。本项目从已有实验结论出发推测银屑病的组织学特性如角质形成细胞的过度增殖，免疫细胞的浸润伴血管生成和Wnt信号转导通路的活化有关，Wnt信号转导通路的关键分子β-catenin的调控对于免疫活性细胞的激活及细胞周期调控、细胞分化有重要影响，若能证实大量细胞因子及趋化因子的浸润和聚集与β-catenin的核转位启动下游靶基因的转录有关，且是其效应靶分子，则可从上游切断其信号级联，达到抑制银屑病炎症反应的效应。酪氨酸激酶抑制剂Gleevec能下调Wnt/β-catenin信号途径转录活性并抑制生长因子受体配体家族的激活，因此我们认为开发Gleevec作为治疗银屑病的新药有很大的应用前景。本项目将首次证实Wnt通路中β-catenin的调控对银屑病免疫活性因子及生长因子家族的影响，并为开发新药提供新的思路。

研究背景：寻常型银屑病是一常见慢性炎症性皮肤病。其发病机制复杂。Wnt信号通路参与许多细胞的生物学功能。Wnt5a与其受体Frizzled结合后通过调控下游分子通路来参与细胞的生物学行为。β-catenin是经典通路关键因子，Wnt5a对β-catenin信号通路具有双重调控作用。而关于Wnt5a/β-catenin信号通路在寻常型银屑病发病中的具体作用机制，目前知之甚少。.研究方法：对Wnt5a、Frizzled2(Fzd2)、Frizzled5(Fzd5)和β-catenin的mRNA和蛋白在寻常型银屑病皮损中的表达进行检测，并对蛋白表达之间的关系进行相关性研究。对Wnt5a、Frizzled2和Frizzled5免疫组化结果半定量评分与PASI评分和病程时长进行相关性分析。用Wnt5a siRNA干扰HaCaT细胞。观察干预后细胞周期和细胞增殖的改变，并在分子水平对其可能的作用机制进行初步研究。.实验结果：1.Wnt5a、Frizzled2和Frizzled5的mRNA在寻常型银屑病皮损中相对表达量高于正常皮肤；而β-catenin mRNA在寻常型银屑病皮损中的相对表达量与正常皮肤近似。2. Wnt5a、Frizzled2和Frizzled5的免疫组化半定量评分与PASI评分呈正相关，而与病程时长没有相关性。3. 沉默Wnt5a的表达后，细胞周期延长，细胞增殖能力减弱。同时β-catenin及其调控的靶因子cyclinD1、PCNA和c-myc的基因和蛋白表达下调。在Wnt5a siRNA预处理的细胞中，加入β-catenin激活剂SB216763后，β-catenin蛋白表达上调，cyclinD1、PCNA和c-myc的基因和蛋白表达上调。β-catenin siRNA转染HaCaT细胞后，β-catenin基因和蛋白都明显表达下调，同时cyclinD1、PCNA和c-myc的基因和蛋白也表达下调。.结论： 1.Wnt5a/β-catenin信号通路参与寻常型银屑病发病过程。2.Wnt5a对角质形成细胞的增殖具有调控作用，在角质形成细胞中，Wnt5a对β-catenin通路具有正性调节作用，Wnt5a/β-catenin通路可能成为治疗寻常型银屑病的候选靶点。