microRNA-378调节宫颈癌放疗敏感性的机制研究

Cervical cancer, the third most common malignancy in women, is often diagnosed at an advanced clinical stage.At present, radiotherapy remains the most common therapeutic intervention for cervical cancer。 Nevertheless, approximately 30%-50% of patients with stage IIB to IV will ultimately fail after radiotherapy, and the main cause of the treatment failure in patients with local cervical cancer is resistance to radiotherapy.Previously,we had obtained several miRNAs relating to the radiosensitivy of cervical cancer using microRNA microarray.We found that miR-181a cound supress the radiosensitivy of cervical cancer in vivo and in vitro,and found the target genes of miR-181a.. In this study, we test miR-378 ,which was screened in provious study, can facilitate the radiosensitivity in vivo and in vitro,and veify the mechanism of mir-378 facilitating the radiosensitivity of cervical cancer .

宫颈癌是女性第三位最常见的恶性肿瘤，在我国大部分宫颈癌诊断时已经是局部晚期，放疗是局部晚期宫颈癌治疗的主要手段之一。但是约30－50％的宫颈癌在治疗后复发，而放射抵抗是宫颈癌复发的主要原因。宫颈癌放射抵抗的机制研究是宫颈癌放射生物研究的重点及热点。我们先前使用放疗敏感和放疗抵抗的标本筛选出多个与放疗敏感性相关的miRNA，在体内体外实验放疗验证了miR-181a能抑制宫颈癌的放疗敏感性，并且寻找到了miR-181a的下游靶基因。在这个研究中我们使用先前筛选出的miRNAs中的miR－378进行体外体内实验，验证miR-378能促进宫颈癌的放疗敏感性，并且寻找验证miR-378的下游靶基因，研究miR-378促进宫颈癌放疗敏感性的机制。

宫颈癌位于危害女性健康肿瘤的第三位，经常发现诊断是属于较晚期的肿瘤。放疗是早期宫颈癌术后最常见的辅助治疗方法也是晚期宫颈主要的治疗方法。然而，大约30-50%的IIB-IV宫颈癌患者在治疗后要复发，引起复发的主要原因是宫颈癌放疗抵抗。临床上尚不能解决如何鉴别放疗抵抗的肿瘤。我们选择13例放疗抵抗的宫颈癌患者标本和26放疗敏感的宫颈癌患者标本进行免疫组化检测。结果显示放疗敏感的宫颈标本中PRKCD的表达阳性。我们建立了稳定表达PRKCD的Siha细胞株和敲掉PRKCD的Me180细胞株。克隆形成实验检查宫颈癌细胞放疗敏感性，过表达PRKCD增加了宫颈癌细胞的放疗敏感性，而敲除PRKCD的细胞放疗敏感性降低。体内实验显示过表达PRKCD裸鼠的肿瘤在接受放射治疗后，肿瘤的体积和重量较对照组明显减小。CCK-8实验检查细胞增殖，结果显示，PRKCD表达的差别不影响宫颈细胞的增殖。流式细胞技术检测宫颈癌细胞放疗后的周期变化，结果显示PRKCD过表达的SiHa细胞放疗后G2/M期比例增加，敲除PRKCD的Me180细胞放疗后G2/M期比例减少。G2/M期细胞对放射线损伤较敏感。流式细胞技术及caspase 3/7 活性检测都显示PRKCD能增加放疗诱导的凋亡。因此我们结论PRKCD能通过调节放疗后宫颈癌细胞周期的变化及凋亡的增加调节宫颈癌的放疗敏感性