发热温度处理的DC源Dexo抗宫颈癌作用及免疫机制研究

宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤，严重威胁妇女的健康。近年宫颈癌的发病有年轻化的趋势。目前临床采用的手术、放疗和化疗等治疗方法不仅创伤大，复发率高，可能剥夺年轻患者的生育功能，而且中晚期宫颈癌患者的治疗效果差。因此，研发一种新的宫颈癌治疗模式对保护妇女健康具有特殊重要的意义。本项目根据"经肿瘤抗原致敏的树突细胞（DC）分泌的囊泡小体（Dexo）可诱导机体产生特异性抗肿瘤效应及发热温度处理可增加Dexo表面功能蛋白表达"的事实，以发热温度处理的DC源Dexo为抗原及抗原递呈分子载体，通过宫颈癌细胞攻击实验阐明Dexo抗宫颈癌的作用及免疫机制；通过Dexo接种荷宫颈癌的模型小鼠研究其杀瘤效果；通过体内抗瘤作用的效果评价，阐明Dexo潜在的应用前景，为宫颈癌和其他肿瘤的临床治疗奠定基础。

树突细胞（dendritic cells, DCs）来源的胞外体（Dexo）含有抗原提呈分子及共刺激分子，介导DC与T细胞间物质与信息交流。因此，Dexo可作为DCs递呈抗原肽的一种途径，将抗原从外周组织传递到淋巴组织，刺激初始T细胞活化及增殖。本研究在前期工作的基础上，构建了能表达人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）E7蛋白的重组痘苗病毒，感染细胞表达蛋白，纯化后用作制备疫苗的刺激抗原；证实发热样温度处理能增加DCs表达抗原提呈分子及共刺激分子，促进DCs成熟；改进分离纯化Dexo的方法，提高Dexo产量及纯度；利用计算机数字图像分析系统获得胞外体长径、短径、周长、等效直径等形态学参数；成功构建了免疫功能重建的SCID小鼠模型，单独接种Dexo，小鼠脾T淋巴细胞增殖反应不明显，诱导产生的抗原特异性的T细胞免疫反应较弱； 较低的免疫原性需要佐剂的辅助，我们选择Candin 作为免疫佐剂提高Dexo的免疫原性，与此同时我们明确了Candin作为宫颈癌治疗疫苗免疫佐剂的效果及其作用机制；Candin与Dexo同时皮内注射能激发有效的T细胞免疫应答。本研究结果将为宫颈癌和其他肿瘤的临床免疫治疗研究奠定坚实的基础。