叉头框基因FOXC2在结直肠癌转移中的作用及其分子机制

我们前期研究中筛选出与结直肠癌转移密切相关基因FOXC2，初步研究证明其在高转移结直肠癌细胞株及结直肠癌组织中表达上调，其过表达可促进SW480细胞发生EMT变化，增加细胞的增殖及侵袭能力，同时可上调Snail、下调E-Cadherin表达，但其在结直肠癌转移中的作用及分子机制仍不明确。本研究拟利用逆转录病毒感染系统，建立稳定表达FOXC2及RNA干扰的细胞模型；通过侵袭实验、整体可视化结直肠癌动物模型观察等方法，在体内、外探讨FOXC2对结直肠癌细胞浸润及迁移能力的影响；通过荧光素酶活性测定、免疫共沉淀等技术，分析FOXC2对E-cadherin及Snail等转录因子的调控机制，探讨FOXC2激活Wnt等信号通路及其诱导EMT的可能机制；利用基因芯片技术及生物信息学方法分析FOXC2的信号传导网络，揭示FOXC2在结直肠癌侵袭转移中作用的分子机制，为结直肠癌转移治疗和药物筛选提供新靶标。

项目完成情况：项目基本按原计划完成。.取得成果：1.建立了稳定表达FOXC2及其RNA干扰细胞株（包括SW480/Vector、SW480/FOXC2、Ls174t/Vector、Ls174t/FOXC2、HT29/Vector、HT29/FOXC2、SW620/Scramble、SW620/shFOXC2、HCT116/Scramble、HCT116/shFOXC2、HCT15/Scramble、HCT15/shFOXC2）；通过MTT、平板克隆实验、soft agar、transwell小室侵袭实验、三维培养、裸鼠皮下成瘤及盲肠原位种植实验动物模型等技术，在体内外实验模型中探讨了FOXC2对结直肠癌细胞增殖、侵袭及转移能力的影响；通过免疫印迹等方法检测了FOXC2对MAPK、AKT信号通路的调控；应用荧光素酶活性测定、染色质免疫共沉淀等方法，分析FOXC2对靶基因的调控机制。2.确定了FOXC2在促进结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移过程中的生物学功能及其在结直肠癌转移中的分子机制；发现FOXC2能激活HGF-MET信号通路及其下游的MAPK、AKT信号通路并证实FOXC2直接结合于MET的启动子区域促进MET的转录，上调MET的表达，促进结直肠癌进展、侵袭与转移。.3.已发表SCI收录论文3篇。待发表SCI收录论文2篇。.4.培养博士生2名。