I/III型胶原蛋白为支架的组织工程鼓膜构建及其用于慢性鼓膜穿孔修复的实验研究

Tympanic membrane perforations (TMP) are common in outpatient settings, which lead to significant hearing loss and may promote infection of the middle ear. Currently, surgical procedures (e.g. myringoplasty) are still routinely performed although with limitations such as high cost, complex skills and donor site morbidity. Moreover, all graft materials have associated limitations. The aim of this study is to develop a novel tissue-engineered tympanic membrane with collagen type I/III scaffolds and seed cells, and to evaluate its efficacy, both from a healing and hearing perspective for the repair of chronic TMP in a rat model. We hypothesized that this type I/III collagen-cell complex would promote tympanic membrane regeneration, enhancing perforation wound healing and hearing restoration. Therefore, this study will be beneficial to further carry out tissue engineering technology for the repair of TMP in clinical settings.

鼓膜穿孔（TMP）是耳鼻咽喉科临床常见病及多发病，是主要的致聋性疾病。慢性TMP的治疗是现今临床尚需解决的难题，传统手术修补方式费用高昂、技巧复杂、创伤较大，并且至今仍缺乏一种理想的鼓膜移植材料。本研究旨在采用一种新型I/III型胶原蛋白支架与种子细胞复合构建成为组织工程鼓膜，并通过体外和动物实验研究其对慢性TMP的再生修复效果，包括穿孔修复和听力康复，探讨一种更为安全、微创、高效、经济、简便并易于向临床推广的慢性TMP治疗方法。如果本项目能够证实该治疗新策略具有促进鼓膜再生修复及听力重建的疗效，那么将为利用组织工程学方法治疗慢性TMP的深入探索研究奠定基础，并能为临床新诊疗技术的开展提供科学依据。

鼓膜穿孔（TMP）是临床常见致聋性疾病，目前主要依赖手术治疗，但手术存在诸多风险与缺陷，因此寻找一种更佳的鼓膜再生治疗方法显得尤为重要，而组织工程技术治疗慢性TMP将是耳科学领域未来发展新趋势。本研究证实，复合鼓膜细胞（上皮细胞和成纤维细胞）的I/III型胶原蛋白支架（ACS）组织工程鼓膜具有与正常鼓膜相近的结构与良好的力学性能，可支持细胞生长、并对细胞迁移与分化具有促进作用。通过大鼠体内动物实验，该组织工程鼓膜可显著促进鼓膜再生与听力康复：耳内镜检查表明其可显著提高TMP愈合率；组织病理学、光学相干层析成像和透射电镜检查证实其可加快穿孔鼓膜愈合过程，促进鼓膜胶原纤维再生，使愈合鼓膜具有良好的形态结构；听性脑干反应功能试验证实其可促进听力功能康复。从而明确该组织工程鼓膜促进鼓膜再生与听力康复效果显著，具有临床应用潜力。.同时，我们研制了大鼠可变径鼓膜通风管，研发了VTMD方法（即鼓膜切开后自制通风管植入、局部联用丝裂霉素C及地塞米松方法），从而成功建立大鼠TMP动物模型，通过耳内镜和组织学技术进行验证，该方法具有高效、简便、微创、廉价并易于推广等优点。此外，我们通过既往文献的荟萃分析，系统评价生物活性分子（包括碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和富血小板血浆）用于TMP的疗效，阐明其在组织工程鼓膜中的应用潜力，从而可促进鼓膜组织工程新技术在临床的应用。.综上所述，本研究证实，复合鼓膜上皮细胞和成纤维细胞的组织工程鼓膜可有效促进鼓膜再生及听力康复。我们后续将深入探索相关作用机制，研究复合细胞的转归，为其后续的临床应用提供科学依据和理论支持。