白细胞介素1受体拮抗剂纳米缓释粒子联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗肝功能衰竭的实验研究

肝细胞移植是治疗肝功能衰竭的有效方法。但供肝细胞来源缺乏、保存困难、细胞增殖力差、移植后免疫排斥反应限制其在临床的使用和疗效。自体骨髓间充质干细胞替代肝细胞作为移植细胞来源，可解决细胞来源缺乏、异体细胞免疫排斥等问题。本项目是在申请人前期大量开展肝细胞/骨髓干细胞移植治疗急性肝衰竭的研究、并发现肝衰竭炎症内环境严重影响移植细胞活性及功能的基础上，选用临床广泛应用的乳糖酰基壳聚糖作为载体材料，构建具有肝靶向作用的白细胞介素1受体拮抗剂载药纳米缓释粒子。将该载药纳米粒子通过外周静脉注入体内，利用其肝靶向性到达肝内；随后自体骨髓间充质干细胞通过门静脉移植至肝内，两者联合应用于猪急性肝衰竭的治疗。以期通过该载药粒子的局部药物靶向缓释，改善肝衰的炎症内环境，从而提高移植细胞的活性和功能，促进自体骨髓间充质干细胞在肝内的增殖与分化，促进肝再生,改善肝脏功能。目的是建立一种全新的肝衰竭治疗方法。

肝细胞移植是治疗肝功能衰竭的有效方法，但肝衰竭炎症内环境严重影响了移植细胞活性及功能。本课题采用了临床广泛应用的乳糖酰基壳聚糖作为载体材料，成功构建具有肝靶向作用的白细胞介素1受体拮抗剂载药纳米缓释粒子，并将该载药纳米粒子通过外周静脉注入体内，利用其肝靶向性到达肝内；随后将自体骨髓间充质干细胞通过门静脉移植至肝内，两者联合应用于猪急性肝衰竭的治疗。.首先，我们通过静电喷射法成功制备出了具有肝靶向作用的白介素1受体拮抗剂（IL-1Ra）壳聚糖纳米缓释颗粒，经酶联免疫吸附实验验证了IL-1Ra纳米颗粒的体外缓释作用，通过荧光显微镜和流式细胞术确定了IL-1Ra纳米颗粒的肝细胞靶向性；其次，我们将IL-1Ra纳米颗粒联合骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝衰竭幼猪，结果显示：与对照组相比，纳米颗粒具有显著炎症环境改善、肝功能恢复和促进肝脏细胞增殖功能；免疫组化及荧光显微镜显示纳米颗粒联合MSCs移植治疗组中GFP-MSCs存活数量明显增多；western blot 显示纳米颗粒MSCs移植治疗组分泌肝细胞生长因子及血管内皮生长因子较其余各组明显增多。实验结果说明IL-1Ra乳糖酰基壳聚糖纳米颗粒具有良好的肝脏靶向和药物缓释作用，IL-1Ra纳米颗粒联合MSCs移植具有明显的协同作用，能通过改善炎症环境和分泌多种细胞因子显著改善D-Gal诱导的急性肝衰竭动物的肝功能指标，促进肝组织再生。.本研究通过该载药粒子的局部药物靶向缓释，改善了肝衰的炎症内环境，从而提高了移植细胞的活性和功能，促进自体骨髓间充质干细胞在肝内的增殖与分化，促进肝再生，改善肝脏功能，建立了一种全新的肝衰竭治疗方法，为肝功能衰竭的临床治疗提供了新思路，具有较高的研究意义。本研究成果共发表文章6篇，其中已见刊：SCI收录论文1篇，中文核心期刊论文2篇；已接受：SCI收录论文1篇，英文核心期刊1篇，中文核心期刊1篇。