乙肝病毒X蛋白（HBx）调节细胞自吞噬的分子机制研究

自吞噬是细胞利用溶酶体降解通路进行自我吞食的过程,在肿瘤及病毒感染中发挥重要作用。乙型肝炎病毒（HBV）感染是肝细胞肝癌（HCC）的重要致病因素，目前有关HBV诱发肝癌的致病机理仍不清楚。我们前期工作发现并证实，HBV X蛋白（HBx）通过上调自吞噬基因beclin 1的表达，促进自吞噬（论文，Hepatology，2009，影响因子10.7）。该工作第一次揭示了HBV感染对自吞噬的促进作用，也是国际上相关研究的第一篇论文。本项目申请正是我们前期工作的延续，旨在从分子水平探讨HBx调节自吞噬的作用机制，研究内容包括三个方面：（1）HBx对自吞噬相关基因的调节作用；（2）HBx对beclin 1蛋白活性的调节作用；（3）HBx影响内质网应激和自吞噬的关系。本项目的实施对于进一步研究自吞噬在HBV致病过程中的作用，探索乙肝早期诊断和治疗的新靶点和新途径具有重要意义。

自吞噬是细胞内主要代谢途径，在病毒感染、癌症等发病机理中起着重要作用。乙型肝炎病毒（HBV）感染是肝癌的重要致病因素。我们前期工作发现HBV X蛋白（HBx）通过上调Beclin 1基因的表达，促进自吞噬（Hepatology, 2009）。本课题继续开展HBx调节自吞噬的机制研究，发现了HBx调节自吞噬的新途径（钙离子-CaMKKβ-mTOR信号通路），鉴定HBx调节自吞噬的潜在靶基因（ATG5、ATG12）和蛋白复合物（Vps34/Beclin 1）。在此基础上，围绕HBV感染与自吞噬，我们进一步发现HBx通过增强自吞噬、抑制线粒体凋亡通路，促进饥饿条件下肝细胞存活，这可能是HBV感染的肝细胞在营养缺陷环境下维持生存的一种重要机制；另一方面，我们建立了自吞噬高通量检测系统，利用该系统对激酶抑制剂化合物库进行初步筛选，获得自吞噬抑制小分子，并从中发现了具有抑制HBV作用的小分子。此外，我们还应用智能化算法对蛋白质相互作用进行分析预测，从系统生物学的角度对蛋白质的相互作用进行了模拟，为深入的实验研究提供了有用的信息。研究工作发表了4篇论文，获得中国发明专利授权1项。