RMP在乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)致癌作用中的分子机制

乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与肝癌的发生密切相关。HBx与RNA聚合酶II的RPB5亚基相结合，而RPB5又与RMP具有很高的亲和性，因此HBx与RMP的关系极为密切。我们最新的研究表明：RMP能够促进肝癌细胞的增殖及其移植瘤的形成。当RMP被干扰后，肝癌细胞即丧失在体内成瘤的能力。然而，目前RMP在HBx诱发肝癌过程中的确切机制尚不清楚。.本课题采用细胞和分子生物学技术，如基因的转染与共表达、克隆形成、裸鼠成瘤、细胞迁移和侵袭等实验。通过检测肝癌组织中RMP与HBx的表达，分析它们与肝癌发生的临床相关性。通过肝癌细胞株中HBx与RMP的共表达，探索RMP对HBx诱导的肝癌细胞增殖和凋亡的影响。应用裸鼠成瘤实验,研究RMP及其突变体在HBx诱导的肿瘤生长中的作用及其意义。本课题旨在阐明RMP在HBx致癌作用中的分子机制，为肝癌的基础和临床研究提供新的靶点。

肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）是一种严重危及人类健康的恶性肿瘤。HCC与乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）的感染密切相关。 HBV的最小的基因编码HBx蛋白。我们以RNA聚合酶II RPB5亚基为探针在肝癌细胞中筛选并克隆到RMP（RPB5-mediating protein, RMP, 又名URI），RMP可以与RPB5结合并调节RNA聚合酶II的转录活性。.本课题旨在阐明RMP在HBx致癌作用中的分子机理。探索它们与肝癌的发生及其临床进展的相关性。通过HBx与RMP在肝癌细胞株中的表达, RNA干扰技术,克隆形成,以及裸鼠成瘤实验等系统的研究，探索RMP对HBx诱导的肝癌细胞增殖及肿瘤形成的影响，剖析其在肝癌的发生和发展中的作用机制。.我的研究发现RMP是一辐射敏感基因。RMP具有促进肝癌细胞的增殖和克隆形成能力。干扰RMP基因的表达可以诱导肝癌细胞的G2期阻滞，并促进肝癌细胞的凋亡。裸鼠成瘤实验进一步证明RMP具有促进体内肝癌移植瘤的生长。分子机制的研究表明RMP具有调节细胞周期因子的表达，促进抗凋亡因子并抑制凋亡因子表达的生物学作用。有意思的是，Krek课题组同时发现RMP（URI）是卵巢癌的癌基因，具有促进卵巢癌的发生和发展的作用（Cancer Cell ,2011,19,317-332）。这一结论表明本研究达到了国际先进水平。.我的进一步的研究表明RMP在肝癌细胞和正常肝细胞中具有不同的作用机制。干扰RMP的表达明显减缓肝癌细胞的增殖，但对正常肝细胞的增殖没有明显的影响。RMP显著影响肝癌细胞的凋亡，但对正常肝细胞的凋亡不产生明显的作用。这些研究表明RMP具有肝癌诊断和治疗的潜在靶标作用（IJBS，2013，9（6）：637-648）。.我们的研究还发现在肝癌细胞中病毒癌基因HBx与细胞癌基因RMP还存在协同作用。HBx与RMP的共表达可以协同促进肝癌细胞的增殖，抑制肝癌细胞的凋亡作用。在裸鼠体内，RMP与HBx可以协同促进移植瘤的生长。RMP与HBx蛋白在肝癌细胞中相互作用，共定位于细胞质中，可以协同抑制凋亡基因的表达，并促进抗凋亡基因的表达（IJBS，2014，10（10）：1181-1192）。