肝X受体调节载脂蛋白M的机制研究

载脂蛋白M在调节脂质代谢，特别是在胆固醇的逆转运中有着重要的作用，肝X受体(liver X receptor, LXR)是脂质代谢的核心调控者。我们前期的研究发现，LXR激动剂T0901317在肝细胞中具有下调apoM表达的作用，且呈剂量依赖性，提示apoM可能是LXR的新的靶基因。有意思的是，Calayir等在肯定了我们的结果的同时，发现在肠上皮来源的肿瘤细胞中LXR的激活能上调apoM的表达。在本研究中，我们拟采用基因转染并结合生物信息手段来研究LXR是直接还是间接调节apoM的表达，如果是间接调控我们将进一步采用共转染和siRNA干扰技术找到调控的中介分子，寻找LXR在肝细胞和肠上皮来源的细胞中对apoM不同调节作用的合理解释，为了解apoM的调控机制提供初步的实验依据。

ApoM 作为新近被发现的载脂蛋白，其调控机制尚未阐明。我们前期的研究结果显示，瘦素、胰岛素、高血糖以及许多细胞因子在体内外都能调节ApoM的表达，ApoM基因的表达也受肝核因子1（Hepatocyte nuclear factor-1, HNF-1）调节，最新的研究结果提示ApoM基因也是LXR的靶基因，但其调节机制尚不明了。本项目应用Dot-blotting、实时定量PCR技术检测实验动物，肝癌细胞株（HepG2），结肠癌细胞株（Caco2）研究肝X受体激动剂、拮抗剂以及一些核受体配体对ApoM及相关信号分子的影响，以期初步明确LXR在体内外调节apoM表达的机制。项目取得成果如下：(1)成功构建了LXR调节ApoM的动物和细胞模型，通过体内外实验研究表明，LXR激动剂TO901317及RXR配体9-顺RA以剂量依赖方式，通过LXR/RXR途径下调ApoM表达，提示ApoM是新的LXR靶基因，这些成果为深入研究脂质代谢开辟了一条有意义的途径。 (2)初步阐明了ABCA1可能通过直接作用于ApoM基因上游调控序列升高ApoM的表达。而并不通过LRH-1这条途径间接调控ApoM的表达。(3)TO901317同时通过LXR和FXR两条途径影响Caco2细胞ApoM的表达。FXR/SHP/LRH1这条转录调控途径在肝细胞及肠上皮细胞中都存在而且起作用，但调节的方向正好相反，结果导致TO901317处理肝来源细胞和肠上皮来源细胞时ApoM 表达水平不一样。这些研究成果将为更好地明确LXR在体内外调节apoM表达的机制提供实验依据。