信号转导分子PAK4相互作用蛋白质的筛选

PAK(P21-activated kinase)家族是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，为Rho家族小鸟苷三磷酸酶Cdc42、Rac下游重要的效应器(effectors)，参与调节细胞骨架结构、细胞移动、凋亡、有丝分裂等重要细胞活动。本实验以PAK4作为诱饵蛋白，从人大肠癌双杂交文库中筛选新的与PAK4相互作用蛋白质。以GST融合蛋白沉降技术，免疫共沉淀技术及Western blot方法在体内外(in vivo and in vitro) 进一步证实蛋白质的相互作用，并确定其相互作用的结合域。同时利用共焦激光扫描显微镜确定PAK4及其作用蛋白在细胞内定位(localization)及共定位(colocalization)。根据发现的PAK4作用蛋白特性，初步研究PAK4及其作用蛋白相互作用的生物学功能。本课题可望发现1-2个新的与PAK4相互作用蛋白质，以加深对PAK4信号转导通路的了解。