RBMS3下调c-Myc在食管癌临床转移中的机制研究

前期研究中我们发现RBMS3能够显著抑制肿瘤细胞生长，并发现RBMS3能够下调c-Myc。最近，有研究发现c-Myc能够激活miR-9，进而调节E-cadherin和β-catenin,最终激发细胞发生表皮-间质转换（EMT）和血管生成。我们的研究发现转入RBMS3能够下调 miR-9， 而RBMS3又是miR-9的靶标。 因此我们推测RBMS3- - c-Myc- - miR-9 形成一个前馈回路，通过影响E-cadherin, β-catenin最终影响肿瘤细胞的EMT和血管生成。预实验结果也显示RBMS3能够抑制细胞的迁移和侵袭能力。根据假设我们设计实验如下：1研究RBMS3,c-Myc, miR-9相互作用及在食管癌临床发生和肿瘤转移中的机制；2研究RBMS3在miR-9、E-cadherin、β-catenin通路中的作用及对细胞发生EMT和血管生成的影响。课题将围绕以上两点进行。

食管癌是严重威胁中国人民身体健康的疾病， 其致死率在全球肿瘤中排名第七位。食管癌的早期转移是困扰临床工作者的一大难题。抑制肿瘤转移是提高食管癌患者预后、提升食管癌患者生活质量的重要措施。前期研究中我们发现RBMS3能够显著抑制肿瘤细胞生长，降低肿瘤细胞转移，并下调c-myc。我们在本研究中采用ChIP(染色质免疫共沉淀)实验和EMSA（凝胶电泳迁移实验）发现RBMS3能够结合c-myc上游的一段21bp的复制起始位点，从而发挥调控作用。由于文献报道c-myc可以调控miR-9。 在高表达RBMS3的食管癌细胞株中往往观察到miR-9的降低。我们将miR-9 在食管癌细胞中过表达后发现c-myc上调，并且体内、体外实验发现miR-9可以引起细胞迁移和侵袭能力增强。通过对miR-9的作用序列进行预测， 发现E-cdaherin可能是miR-9的可能作用靶基因。萤光素酶实验发现miR-9对E-cadherin确实具有调控作用， 并上调c-myc，CD44和VEGF等，并导致细胞发生表皮-间质转换（EMT），Vimentin和 Fibronectin等分子发生改变，从而促进肿瘤细胞的迁移和侵袭。因此，在RBMS3 - c-myc – miR-9之间形成一个互相作用的分子调控机制在食管癌的转移中发挥作用。对此作用机制的研究将有助于我们深入了解食管癌的转移机制，从而实现采取措施来抑制食管癌的 早期转移，从而使患者获益。