Intermedin对肾脏缺血再灌注损伤修复过程的影响及机制研究

肾脏缺血再灌注损伤（IRI）导致的急性肾衰竭（ARF）发病率和死亡率都很高，尚缺乏有效的防治手段。减轻急性期损伤和促进肾组织修复再生的因素均能减轻肾脏IRI。我们的前期研究表明，Intermedin（IMD）能减轻急性期损伤；同时我们观察到，肾脏IRI之后IMD在肾组织持续高表达；用IMD干预后肾组织修复加速，提示它能促进修复和再生，机制值得深入探讨，但国内外尚未见有报道。本项目观察IMD对肾脏IRI修复过程的影响及机制。首先观察肾脏IRI修复过程中IMD表达的变化；用基因转染的方法使肾组织局部高表达IMD，观察其对肾组织修复及再生过程的影响；然后观察IMD对肾脏IRI修复再生过程中相关形态基因表达及细胞周期调节蛋白的影响，探讨其促进肾脏IRI修复再生的机制；最后在培养的大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）上观察IMD促进肾小管上皮细胞增殖，进而促进肾组织结构和功能恢复的信号转导途径。

肾脏缺血再灌注损伤（IRI）导致的急性肾衰竭（ARF）发病率和死亡率都很高，尚缺乏有效的防治手段。减轻急性期损伤和促进肾组织修复再生的因素均能减轻肾脏IRI。我们的前期研究表明，Intermedin（IMD）能减轻急性期损伤；便对肾组织修复和再生的影响尚未见有报道。本项目观察IMD对肾脏IRI修复过程的影响及机制。首先我们观察到肾脏IRI修复过程中IMD的表达明显上调；肾脏修复过程中PCNA阳性细胞数目逐渐增加，第7天达到高峰，用基因转染的方法使肾组织局部高表达IMD后，PCNA阳性细胞数目进一步增加，且在第3天就达到高峰；肾脏缺血再灌注损伤后，与血管生成相关的蛋白质（HIF-1a、VEGF和Tie-2）和肾脏发生相关的蛋白质（Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和Vimentin）在第1、2、3、4天均明显上调，细胞周期相关的蛋白质（cyclin D1、cyclin E、CDK2和 CDK4）在第1、2、3、4、7、14天均明显上调，IMD干预后，以上蛋白质的表达较模型组提前1-4天，且丰度增加。最后我们在培养的大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）上观察IMD促进肾小管上皮细胞增殖，进而促进肾组织结构和功能恢复的信号转导途径。我们发现IMD能增加细胞活力、降低LDH水平。IMD能增加p-ERK/ ERK，降低-JNK/JNK和p-P38/P38。IMD能通过增加cyclin D1和cyclin E的表达促进细胞周期进展，这些作用可以被ERK、JNK、P38抑制剂所阻断。IMD还能增加cyclin D1启动子和AP-1 DNA结合活性。这些结果说明IMD通过ERK、JNK、P38途径cyclin D1的表达，从而促进细胞增殖，加速再灌注损伤修复。