M1-Ach受体调控SST-GABA能中间神经元在针刺抗抑郁中的作用机制研究

Clinical practice demonstrated that acupuncture was efficient in treating depressive disorder. However, the underlying mechanism is still unknown. According to the latest progresses in antidepressant researches, the streamline that “glutamate burst- activated AMPA receptor- BDNF releasing- mTORC1 signaling pathway- synaptic plasticity ”operated by GABA internuncial neurons, glutamic pyramidal neurons and post synaptic neurons, is key antidepressant mechanism. We had proved in our previous studies that acupuncture was significantly improved expression of BDNF, glutamate and synaptic proteins. But how these factors was interacting is unclear. Thus, we speculate that “acupuncture may inhibits M1-Ach receptor on SST-GABA internuncial neurons and activates mTORC1 signaling pathway to achieve antidepressant effect”. We will employ behavioral, immunological and Cre gene reconstruction and shRNA silence technical methods to further elaborate the exact mechanism.

临床研究表明针刺治疗抑郁症具有良好疗效，而其内在机制尚未完全阐明。现阶段抑郁症研究的最大进展是由GABA能中间神经元、谷氨酸能椎体神经元、突触后膜三个环节参与的“谷氨酸骤增-AMPA受体激活-BDNF释放-mTORC1通路激活-突触修复”的抗抑郁机制。我们前期研究已经证实针刺可以增加BDNF和谷氨酸表达，激活AMPA受体和升高突触蛋白表达，但激发上述改变的细胞初始环节尚未明确。因此，本研究从该抗抑郁机制的“扳机点”GABA能中间神经元角度，围绕“针刺通过拮抗前额叶SST-GABA能中间神经元的上的M1乙酰胆碱受体，激活mTORC1通路，调控突触可塑性实现抗抑郁效应”假说，用行为学、免疫学、Cre基因重组和shRNA基因构建与干扰技术，进一步探讨针刺抗抑郁的机制。

现代研究表明针刺治疗抑郁症具有良好疗效。由GABA神经元、锥体神经元、突触后膜三个环节参与的“谷氨酸骤增-AMPA受体激活-BDNF释放-mTORC1通路激活-突触修复”的抗抑郁机制是其中的热点。我们前期研究已经证实“疏肝调神”针刺可以增加谷氨酸表达，激活AMPA受体和升高突触蛋白表达，但激发上述改变的细胞初始环节尚未明确。因此，本研究针对该抗抑郁机制的GABA中间神经元节点，围绕“针刺通过拮抗前额叶SST-GABA神经元的上的M1-AChR，激活mTORC1通路，调控突触可塑性实现抗抑郁效应”假说，进一步探索针刺抗抑郁的机制。.本次研究由表入里共分为三个子研究，从起始的“M1-AChR介导的针刺抗抑郁机制”到“前额叶M1-AChR参与的针刺抗抑郁机制”研究，明确了M1-AChR参与针刺抗抑郁不可或缺的中间环节及前额叶是抗抑郁的关键脑区，再到 “SST-GABA能中间神经元参与M1-AChR介导的针刺抗抑郁 ”进一步明确了针刺抗抑郁作用的起始效应细胞是SST-GABA神经元。采用SD大鼠、B6 WT型小鼠、B6转基因Cre鼠，根据组别给予针刺、东莨菪碱、毒扁豆碱与槟榔碱干预。用FST、 SPT、 NSFT、TST评价行为学改变；用前额叶Glu含量并从突触蛋白和突触后膜动作电位评价关键通路mTORC1的激活情况；用GABA细胞内向电流、兴奋性突触后电流和前额叶FosB+探究针刺起效的起始靶点。.研究结果显示，针刺干预对比拟胆碱药槟榔碱上调了前额叶Glu含量，其激活mTORC1通路、增加FosB+含量的效应与M1-AChR拮抗剂东莨菪碱类似，定向敲除SST-cre型鼠前额叶M1-AChR后，针刺干预不能起效，证实前额叶上SST-GABA神经元为起始点。研究结果印证了方案中的“针刺通过拮抗前额叶SST-GABA神经元上M1-AChR，实现抗抑郁效应”假说，为针刺抗抑郁机制研究提供了新思路，为针刺治疗抑郁症提供了科学的实验证据。