肝细胞癌血管生成拟态的分子机制研究

血管生成拟态是近年来在肝细胞癌（肝癌）等恶性肿瘤中发现的一种全新的肿瘤内血管生成模式，被认为是抗血管生成治疗肿瘤的新靶点，但其分子机制尚不清楚。我们近期利用诱发性大鼠肝癌模型研究肿瘤血管生成的过程及特性，发现在发生肺转移的大鼠肝癌标本中存在血管生成拟态现象；临床研究证实具有血管生成拟态的肝癌易发生血行转移、患者预后差。本项目拟借鉴血管生成拟态在其它恶性肿瘤中的研究成果和策略，在前期肝癌血管生成拟态研究的基础上，建立肝癌细胞三维培养模型和裸鼠人肝癌原位移植模型，研究遗传背景相似、不同转移潜能人肝癌细胞株体外和体内血管生成拟态的差异，在此基础上应用血管生成基因芯片、细胞外基质与粘连分子基因芯片筛选血管生成拟态关键的差异基因，并采用RNA干扰等技术验证关键差异基因在肝癌血管生成拟态中的作用，深入探索肝癌血管生成拟态的分子机制，为抗血管生成治疗肝癌提供新靶点，完善现有的抗血管生成治疗肝癌的策略。

血管生成拟态（VM）是近年来在肝细胞癌（肝癌）等恶性肿瘤中发现的一种全新的肿瘤内血管生成模式，被认为是抗血管生成治疗肿瘤的新靶点，但其分子机制尚不清楚。课题组通过研究不同转移潜能人肝癌细胞株HCCLM3、MHCC97-H和MHCC97-L（转移潜能由高到低）体内、外形成VM的差异，并利用血管生成、细胞外基质与粘连分子基因芯片筛选细胞间差异表达的基因，以探索VM血管生成及细胞外基质相关机制。探讨两种基因芯片所筛选差异表达基因之血管生成相关基因Jagged 1和细胞外基质相关基因骨桥蛋白（OPN）在肝癌VM形成中的作用。课题组还研究了Nodal 在肝细胞癌中的表达及其意义并利用RNA干扰技术对人肝癌细胞Nodal基因表达进行沉默，观察其对肝癌细胞生物学行为及血管生成拟态形成的影响。研究缺氧对肝癌VM的影响及其可能机制。研究血管生成抑制剂TNP-470对MHCC97-H体外形成VM的影响。研究表明高转移人肝癌细胞株体内、外形成VM能力明显较低转移人肝癌细胞株强，其原因可能与高转移人肝癌细胞株差异表达某些血管生成或细胞外基质与粘连分子相关基因有关。差异表达的基因——血管生成相关基因Jagged 1与细胞外基质相关基因OPN可能是肝癌VM形成的关键调节基因，在VM形成过程中起着重要的促进作用。Nodal可能与肝癌的发生发展有关，可能作为肝细胞恶性变的重要预测指标。干扰Nodal基因表达可明显抑制肝癌细胞的生物学行为及VM形成。缺氧能促进肝癌VM形成，诱导HIF-1α、MMP-2和MMP-9表达可能是其作用机制之一。TNP-470能抑制肝癌体外形成VM。这些研究结果将有助于加深对肝癌血管生成模式的理解，为抗血管生成治疗肝癌提供新的靶点，并完善现有的抗血管生成治疗肝癌的策略。