导入系统与表达调控双靶向的水泡口炎病毒M蛋白抗肿瘤作用研究

我们前期研究发现水泡口炎病毒VSV的M蛋白具有良好的抗肿瘤活性，相关结果已发表了多篇研究论文，包括FASEB J,JMM,Ann Oncol等较高影响因子的杂志。为了进一步增强抗肿瘤效果并降低毒副作用，我们拟赋予M蛋白质粒靶向性。由于肿瘤细胞高表达叶酸受体和端粒酶，因此我们采用叶酸修饰的PEI纳米材料包裹M蛋白质粒，同时用人端粒酶基因hTERT的启动子替换现有M蛋白质粒上的CMV启动子，赋予M蛋白基因输送和表达调控两个水平上的双重靶向性，从而使得M蛋白能够更好地在肿瘤细胞靶向富集和表达，将其对非肿瘤组织的影响减到最小，更好地发挥其抗肿瘤作用并降低毒副反应。此双重靶向策略如果成功可以为M蛋白质粒最终的临床应用奠定基础，同时也能为肿瘤的靶向基因治疗研究提供一种新思路和新途径。

我们成功构建了hTERT启动子调控的M蛋白质粒phTERTP-M，并验证了其序列的正确性和体外表达M蛋白的靶向性。我们选择了hTERT较高表达的肺腺癌细胞A549和SPC-A1作为研究phTERTP-M质粒靶向抗肿瘤活性的主要模型。我们发现phTERTP-M在体内外对A549和SPC-A1均具有明显的抗肿瘤活性，并且phTERTP-M比pVAX-M的抗肿瘤作用更强。更为重要的是，通过免疫组化从蛋白质水平分析发现， phTERTP-M处理后能够促使MP更高地在肿瘤组织表达，同时降低了MP在其他主要组织器官中的表达分布，因而phTERTP-M具有较良好的靶向性抑制人肺腺癌裸鼠移植瘤模型的作用。我们的研究能够为启动子靶向的抗肿瘤基因治疗研究提供依据研究经验，具有一定的参考价值。. 此外，我们还对MP基因治疗与顺铂联合应用于肿瘤治疗的可行性进行了初步探索，发现了MP基因治疗和顺铂联合使用可以明显增强顺铂的抗肿瘤效果，其机制可能和增强诱导肿瘤细胞凋亡以及诱导机体的抗肿瘤免疫反应有关，也为M蛋白质粒的临床应用奠定了一定的基础。