慢性淋巴细胞白血病NF-KappaB信号通路乙酰化修饰及其靶点治疗价值研究

Chronic lymphocytic leukemia (CLL)is a kind of B cell clonal malignance diseases, and some CLL patients who have p53 gene mutations or deletions were resistant to common chemotherapy, which indicates that more new and effective strategies should be raised. NF-κB signal pathway has absorbed great interest of research fellow and been very hot for its role in the development of tumor.However, the mechanism of histone acetylation/deacetylation and its target genes are not still clear, nor the value for molecular target therapy in resistance CLL patients.Based on the previous NSFC (No.81000216) project, the expression of members and modulars in NF-κB pathway will be focused; the mechanism of histone acetylation/deacetylation and the target genes will be discovered; molecular target therapeytic value in chemotherapy resistance/p53 gene abnormal CLL, by in vitro and in vivo experiments，will also be studied. It can inprove CLL strategies for resistance/refractary patients and provide theries for molecular targeting therapy.

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种B淋巴细胞克隆增殖性疾病，部分CLL患者伴有p53基因异常，化疗敏感性差，迫切需要探讨新的治疗策略。转录因子NF-κB由于具有致瘤性而得到研究人员的广泛关注，成为研究热点。然而其在CLL中的组蛋白乙酰化修饰作用环节及机制并未证实，更没有深入探讨其作为耐药治疗的靶点价值。本课题拟在既往国家自然科学基金课题（编号：81000216）基础上，进一步探索CLL细胞NF-κB各成员/调节物表达情况；揭示表观遗传学组蛋白修饰（乙酰化/去乙酰化）在CLL细胞NF-κB信号通路中的作用；筛选并鉴定调控基因、位点及下游靶基因情况；体外/体内实验鉴定分子干预组蛋白修饰NF-κB信号通路在CLL患者中作为氟达拉滨耐药/p53基因异常患者治疗的潜在价值，结合临床及生物学特征探讨与药物干预治疗的相关因素，进而为推动难治CLL治疗方法的改进及肿瘤的分子靶向治疗提供理论依据。

慢性淋巴细胞白血病(CLL)发病率逐年增高，伴有p53基因异常CLL患者疗效更差，这引起了广大临床和科研工作者的广泛注意。本课题在既往研究基础上，进一步探索CLL细胞NF-κB各成员/调节物表达情况；揭示表观遗传学组蛋白修饰（乙酰化/去乙酰化）在CLL细胞NF-κB信号通路中的作用，进而为推动难治CLL治疗方法的改进及肿瘤的分子靶向治疗提供理论依据。本研究对138例CLL患者骨髓或外周血标本应用流式细胞术检测p53功能、FISH技术检测p53和ATM基因(p53上游基因)缺失、PCR联合DNA序列测定检测p53基因突变。其中17％的CLL患者具有p53功能异常，p53和ATM基因缺失分别占16％和10％，13％的CLL患者有p53基因突变。进一步揭示发病机制相关的典型模式（stereotype BCR）发现我国CLL病人的IgVH相对西方国家有更高的突变率（我国61% Vs.西方 55%），使用片段情况也有明显差异。我们典型模式BCR占16.56%，显著低于西方数据（30%）。在对NF-κB信号通路成员的分析未发现具有重要预后意义的指标。耐药机制研究发现主要是进一步拓展性探讨CLL相关疾病多发性骨髓瘤（MM）多药耐药基因（MDR1）的预后价值。结果发现：在MM患者中，MDR1基因C1236T位点T患者血钙显著低于C患者。同样在1236上，基因型CT相比较CC显著延长无进展生存期（PFS）（中位时间：48个月和28个月，P = 0.0062；HR = 0.21；95% CI0.061–0.715）。而携带T等位基因的患者（CT和TT基因C3435T）与无T的患者相比有一个较长的PFS，中位时间分别为60个月和29个月；P = 0.038；HR = 0.508；95% CI 0.264 - 0.978）。由于构建模型失败，未能完成动物实验部分。该研究对CLL的临床及生物学特征（免疫分型、细胞遗传学、P53突变等）进行了系统分析，并检测了NF-κB通路的重要成员，研究了MDR1基因对CLL及相关疾病的影响，对进一步深入探究难治性CLL的发病机制及临床对策提供了参考性资料。