新型可降解纳米凝胶载体肝素修饰PEI介导人新基因PNAS-4抗卵巢癌基因治疗研究

卵巢癌是妇科恶性肿瘤中最主要的致死原因，五年生存率一直较低。我们需要寻求更为有效的和低毒的治疗手段用于卵巢癌治疗。PNAS-4是由申请者实验室发现并克隆，课题组成员在前期工作中已证实人PNAS-4有明显的抑制人卵巢癌细胞增殖，诱导其凋亡的作用。同时在前期工作中已成功合成肝素修饰的可降解的PEI纳米凝胶。在此基础上，本课题针对卵巢癌治疗的难点和瓶颈，根据课题组成员的前期科研成果，将HE4启动子插入已构建的hPNAS-4真核质粒载体中形成新的HE4-hPNAS-4载体，起到靶向卵巢癌，调节hPNAS-4表达的作用。然后利用新型可降解H-PEI纳米凝胶介导HE4-hPNAS-4质粒从体外和体内实验两个层面，采用分子生物学，细胞生物学和病理形态学等方法来研究其对细胞/肿瘤增殖、凋亡及细胞周期，肿瘤血管生成等的影响，并探索此治疗方法的可行性，为临床卵巢癌耐药治疗提供新的方法和依据。

卵巢癌是妇科恶性肿瘤中最主要的致死原因，五年生存率一直较低。我们需要寻求更为有效的和低毒的治疗手段用于卵巢癌治疗。PNAS-4是由申请者实验室发现并克隆，课题组成员在前期工作中已证实人PNAS-4有明显的抑制人卵巢癌细胞增殖，诱导其凋亡的作用。同时在前期工作中已成功合成肝素修饰的可降解的PEI纳米凝胶。本课题为保证H-PEI纳米凝胶生产的有效性、安全性和一致性，对该纳米凝胶进行质量控制。在此基础上，本课题将HE4启动子插入已构建的hPNAS-4真核质粒载体中形成新的HE4-hPNAS-4载体，起到靶向卵巢癌，调节hPNAS-4表达的作用。然后利用新型可降解H-PEI纳米凝胶介导HE4-hPNAS-4质粒从体外和体内实验两个层面，对细胞/肿瘤增殖、凋亡及细胞周期，肿瘤血管生成等的影响，发现HE4-hPNAS-4具有良好抗肿瘤作用。hPNAS-4抗肿瘤的机制促进肿瘤细胞凋亡和抗血管生成有关。H-PEI纳米粒是一种安全、有效的基因载体。本实验为卵巢癌的治疗提供了一种很有前景的新方法和思路。