GRIM-19靶向抑制子宫颈癌细胞p53蛋白降解作用的机制研究

子宫颈癌是高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染导致的严重威胁妇女健康的重大疾病，HR-HPV编码的E6蛋白及其结合蛋白E6AP介导的p53蛋白降解是子宫颈细胞癌变的关键性环节，本课题组前期研究发现稳定转染GRIM-19的子宫颈癌细胞株中p53蛋白的积聚显著增多，为阐明其机制，前期研究初步表明GRIM-19并不影响p53基因的转录水平，但是稳定转染GRIM-19的细胞株中p53蛋白的半衰期显著延长，并证实GIRM-19与E6具有蛋白的相互结合作用，佐证了子宫颈癌细胞中p53蛋白的降解主要由E6-E6AP复合物介导，鉴于上述结果，本课题将进一步研究GRIM-19与E6、E6AP的蛋白相互作用的分子机制，并且筛选出GRIM-19蛋白分别与E6、E6AP蛋白的结合位点，为合成GRIM-19特异性靶向E6蛋白或者E6AP蛋白的结合位点多肽奠定基础，从而为子宫颈癌的防治提供新的思路。

本课题研究的主要成果如下：① 首次报道了GRIM-19表达的升高可以抑制E6蛋白的表达、升高p53蛋白、抑制端粒酶活性及VEGF、MMP-2的表达；② 证实GRIM-19具有抗子宫颈癌的重要生物学作用；通过体内外的蛋白相互作用证实GRIM-19与高危型HPV18的E6蛋白具有相互作用，及GRIM-19与E6AP的蛋白相互作用，并明确了相互作用位点，为子宫颈癌的生物治疗提供了新的靶点：③ 通过恢复GRIM-19蛋白的表达，可以拮抗HPV18表达的E6的致癌作用；并且提出GRIM-19蛋白的表达升高还可以抑制STAT3的蛋白持续激活及其致癌作用。④证实HPV整合致宫颈上皮细胞恶性转化后引起RARβ2表达的降低/缺失，采用组蛋白脱乙酰化酶抑制剂（HDACi）能够提高组蛋白H3乙酰化水平，显著上调宫颈癌细胞RARβ2的表达，从而与ATRA协同发挥抗肿瘤作用。在上述研究的基础上申报了国家自然科学基金1项：基于表观遗传修饰调控RARβ2介导的HPV转化细胞分化的作用机制，获得资助经费72万元，为课题的有效延续和深入研究提供了充足的经济保障。⑤培养了博士1名、硕士研究生10名；发表SCI文章5篇，国内核心期刊9篇。