UHRF1对肿瘤抑制蛋白p53的泛素化降解调控研究

肿瘤抑制蛋白p53是一个维持基因组稳定性和抑制细胞恶性转化的重要转录因子，p53蛋白在细胞内受到紧密调控，静息状态时的p53通过泛素-蛋白酶体途径组成性地降解，维持在较低水平,但在癌基因激活、DNA损伤等应激条件下p53蛋白迅速变稳定，行使功能。p53稳定性调控的紊乱被认为是肿瘤发生发展过程中的一个重要因素。UHRF1是一个E3泛素连接酶，被报道在多种恶性肿瘤中显著上调，但其促进肿瘤恶性转化的分子机制却不清楚。我们在前期的肿瘤相关基因功能筛选中发现，UHRF1是一个新的p53信号通路负调控因子。它可以和肿瘤抑制蛋白p53在体内和体外相互作用，多聚泛素化修饰p53，并促进p53的泛素-蛋白酶体途径降解。本研究将选用肝癌作为研究模型，系统性研究UHRF1对p53的泛素化修饰调控、UHRF1对肿瘤细胞株增殖、凋亡和成瘤能力的影响，并探讨其作为分子诊断marker和药物靶点的可能性。

肝癌是我国人群最常见的癌症之一，其发病的分子机制非常复杂，也成为当下迫切的研究热点。p53 是目前发现在肝癌中突变频率最高的基因，和肝癌的发生和发展存在密切联系。在肿瘤演进过程中，p53 的活性受抑制过程存在一个精细的调控网络，其具体的分子机制还没有完全阐明。我们在前期研究中发现了一个E3 泛素连接酶UHRF1 在肝癌中显著上调。在分子机制上，我们发现UHRF1 可以和肿瘤抑制蛋白p53 相互作用，并且可以通过泛素-蛋白酶体途径降解p53。推测UHRF1 可以通过负调控p53 信号途径促进肝癌的恶性转化。通过本课题的研究发现，UHRF1 的表达和肝癌临床指标的相关性具有相关性。UHRF1高表达的肿瘤的大小偏大，TNM分期较高。同时UHRF1高表达的病人的预后较差。说明UHRF1可以作为肝癌临床诊断的分子标志物。在分子机制上，我们发现UHRF1可以和p53在内外源相互作用，控制p53蛋白的稳定性并介导p53的泛素化依赖性降解。在细胞水平，我们发现UHRF1可以促进肿瘤细胞的锚定依赖性和非依赖性生长。并且UHRF1可抑制化疗药物对肝癌细胞的杀伤作用。肝癌细胞中消减UHRF1的表达可显著抑制肝癌细胞在裸鼠上的生长。通过上述研究，我们确定了UHRF1是一个在肝癌中显著上调表达，并能促进肝癌细胞生长的肿瘤基因。UHRF1是肝癌临床诊断的分子标志物，同时也是一个肝癌靶向治疗药物开发的针对的分子靶点。