气道炎症细胞表型及生物靶标与中国儿童哮喘预后的关联性研究

儿童哮喘是中国社会公共卫生领域的重要问题，儿童哮喘的预后有一定的不可知性，而错误的判断预后可能导致过度治疗或延误治疗，给社会和患者造成更多不必要的经济损失和心理压力。本研究在前期工作发现了与成人哮喘治疗相关的不同气道炎症表型，以及获得澳洲乌考克研究所关于哮喘生物靶标筛选的技术支持的前提下，通过在较大中国哮喘儿童样本中进行的描述性研究，分析中国哮喘儿童的气道炎症细胞亚型及血中生物蛋白靶标；进一步通过前瞻性的纵向队列研究，探讨气道炎症细胞亚型及血中生物蛋白靶标对中国儿童哮喘预后的评估意义。

本项目按预期完成了儿童哮喘血浆相关蛋白靶标的筛选工作及蛋白靶标ELISA临床确证实验。进行了蛋白靶标与肺功能相关指标及诱导痰炎症细胞的关联性分析，进行了蛋白靶标与儿童哮喘预后相关分析。蛋白靶标筛选方面，完成儿童稳定性哮喘的血浆生物标志物筛选工作。筛选鉴定蛋白如下：抗凝血酶III、α2巨球蛋白、CD5L、补体C3、补体C4a、补体C3b、补体C1s、IGKGIgkappa 、未知蛋白点NO837及NO2204 。根据蛋白表达趋势及与哮喘发病的相关性，将候选蛋白靶标AT-III、补体C3、A2M及CD5L进行了ELISA临床验证。结果示血浆ELISA结果与蛋白质组学分析结果基本一致。具体为：AT-III表达水平在哮喘组高于健康对照组，A2M、补体C3在哮喘组低于健康对照组，因此AT-III、补体C3、A2M可作为辅助儿童哮喘诊断的候选蛋白靶标；儿童哮喘不同轻重程度组间比较中，AT-III、CD5L、A2M的表达水平在多组间比较差异有显著性，且AT-III及CD5L、A2M随病情加重其表达水平分别有上升及下降趋势，同时其与目前衡量儿童哮喘病情轻重的肺功能指标存在明显的相关性， AT-III、CD5L、A2M可作为辅助评估儿童哮喘疾病轻重的蛋白靶标；儿童哮喘有无家族史组间比较，CD5L表达水平在阳性家族史组低于阴性家族史组，且差别有显著性，可能为儿童哮喘发病机制相关的蛋白靶标。儿童血浆蛋白与儿童哮喘预后关联研究中，经3年随访，将研究对象按不同转归重新分组，组间比较示CD5L表达水平随转归结局加重有下降趋势，表明CD5L表达水平低、CD5L表达水平降低提示预后不良，CD5L可作为辅助评估儿童哮喘预后的蛋白靶标；AT-III在转归组间分布示其表达水平与转归加重呈正相关，个体随转归好转AT-III表达水平有下降趋势，AT-III表达水平高、AT-III表达水平升高提示儿童哮喘预后不良。A-TIII可能与儿童哮喘预后相关；在诱导痰炎症细胞与血清蛋白靶标的关联性研究中，儿童哮喘稳定期痰炎症细胞以巨噬细胞为主，重度哮喘患儿痰中嗜酸性粒细胞增多。诱导痰嗜酸性粒细胞比率及中性粒细胞比率分别与CD5L及A2M呈负相关，嗜酸性粒细胞比率与AT-III呈正相关。痰巨噬细胞比率与CD5L、A2M呈正相关。因此侵入性小的血浆蛋白靶标可反映哮喘儿童气道炎症情况。