S100A14在乳腺癌侵袭转移中的功能、机制及其信号通路的研究

S100A14是S100家族成员，目前对其功能报道甚少，我们前期研究发现S100A14 以p53依赖的方式参与对MMP2的调节进而促进细胞侵袭；胞外的S100A14蛋白可与RAGE结合激活MAPK和NF-κB通路调节细胞增殖。本课题拟在此基础上，进一步深入探讨S100A14与p53状态、ErbB2、MMP2表达相关性，并分析S100A14与上述分子联合作用与乳腺癌转移、预后的相关性。通过检测血清中S100A14的量，评判其是否可能作为乳腺癌的血清学诊断标记物。研究S100A14 对EGFR/ErbB2信号通路的影响；验证S100A14的分泌与表达之间是否存在正反馈调节环路；阐明S100A14被泛素化修饰的具体机制。该研究不仅有助于阐明乳腺癌发生发展的分子机制，而且对于寻找判断乳腺癌转移、预后的分子标志物、设计新的抗肿瘤药物、有针对性的个体化治疗都有十分重要的科学意义。

目的: 本项目旨在研究EF手相钙结合蛋白家族成员-S10014在乳腺癌发生发展中的功能及其作用机制，分析S100A14在乳腺癌组织中表达和血清中含量与临床指标的相关性，为寻找判断乳腺癌转移、预后的分子标志物提供重要的理论基础。方法: 采用WST、FACS、Transwell、细胞免疫荧光等方法研究S100A14的生物学功能；通过Real-time PCR、Western Blot、Luciferase assay、染色质免疫共沉淀（ChIP）、免疫共沉淀（Co-IP）、GST pull down等方法研究S100A14参与的信号通路和调控机制；通过免疫组化（IHC）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测S100A14在乳腺癌组织中表达与血清中含量。结果：研究表明S100A14通过与细胞膜表面受体RAGE相互作用激活MAPK和NF-κB信号通路从而调节细胞增殖；S100A14以p53依赖方式调节MMP2的转录进而影响细胞侵袭能力；S100A14在乳腺癌组织中表达与HER2显著相关，通过与HER2相互作用调节HER2下游信号通路p-AKT和p-ERK的激活，从而调节HER2介导的细胞增殖；我们的研究也表明S100A14是AP-1和KLF4转录调节的靶基因，调节细胞增殖和分化；临床标本研究表明S100A14在乳腺癌组织中显著过表达，血清中S100A14含量亦可有效区分乳腺癌、乳腺良性肿瘤患者及健康对照。结合GEO临床数据库分析表明S100A14/HER2共表达与肿瘤分期、转移、预后等临床指标显著相关。结论：我们研究表明S100A14可通过影响细胞周期、增殖、凋亡、侵袭迁移等不同的信号途径影响乳腺癌的发生发展，这些研究结果提示S100A14有可能成为重要的肿瘤治疗的靶点，对下一步的转化医学研究提供了重要的理论依据。